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논문 기본 정보

자료유형
학술저널
저자정보
이재일 (한남대학교) 김인섭 (한남대학교)
저널정보
한국생물공학회 KSBB Journal KSBB Journal 제29권 제5호
발행연도
2014.10
수록면
361 - 371 (11page)

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Mycoplasma is well recognized as one of the most prevalent and serious microbial contaminants of biologic manufacturing processes. Conventional methods for mycoplasma testing, direct culture method and indirect indicator cell culture method, are lengthy, costly and less sensitive to noncultivable species. In this report, we describe a new TaqMan probe-based real-time PCR method for rapid and quantitative detection of mycoplasma contamination during manufacture of biologics. Universal mycoplasma primers were used for mycoplasma PCR and mycoplasma DNA was quantified by use of a specific TaqMan probe. Specificity, sensitivity, and robustness of the real-time PCR method was validated according to the European Pharmacopoeia. The validation results met required criteria to justify its use as a replacement for the culture method. The established real-time PCR assay was successfully applied to the detection of mycoplasma from human keratinocyte and mesenchymal stem cell as well as Vero cell lines artificially infected with mycoplasma. The overall results indicated that this rapid, specific, sensitive, and robust assay can be reliably used for quantitative detection of mycoplasma contamination during manufacture of biologics.
#Mycoplasma detection #TaqMan probe #Real-time PCR #Validation #Biologics

목차

Abstract
1. INTRODUCTION
2. MATERIALS AND METHOD
3. RESULTS AND DISCUSSION
4. CONCLUSION
REFERENCES

참고문헌 (23)

참고문헌 신청
1. [학술지(정기간행물)] - Razin, S. / 1998 / Molecular biology and pathogenicity of mycoplasmas / Microbiol. Mol. Bio. Rev 62 : 1094 ~ 1156 google schola 2. [학술지(정기간행물)] - Razin, S / 2010 / Highlights of mycoplasma research-an historical perspective / Biologicals 38 : 183 ~ 190 google schola 3. [단행본] - Roger, J. M. / 1998 / Mycoplasma protocols / Human Press : 1 ~ 6 google schola 4. [단행본] - Masover, G. / 1981 / The prokaryotes / Springer-Verlag : 2247 ~ 2270 google schola 5. [학술지(정기간행물)] - Hay, R. J. / 1989 / Mycoplasma infection of cultured cells / Nature 339 : 487 ~ 488 google schola

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