포도주에서 분리한 Saccharomyces cerevisiae JS59가 생성하는 Invertase의 정제 및 특성

Q: 이 논문에서 정의한 Invertase란 무엇인가?

Invertase는 sucrose의 β-D-fructofuranoside 결합을 가수분해하여 fructose와 glucose를 생성하고 raffinose를 분해하여 fructose와 melibiose를 생성하는 효소이다. 또한 fructotransferase 반응을 촉매하며, 특히 sucrose로부터 invert sugar를 생성하여 식품 공업에서 감미료 제조에 유용하게 이용된다.

Q: Saccharomyces cerevisiae JS59 유래 Invertase의 주요 특성은 무엇인가?

연구 결과, Saccharomyces cerevisiae JS59 유래 Invertase는 분자량 38.5 kDa이며, 최적 pH 5, 최적 온도 55°C에서 높은 활성을 나타낸다. pH 4~6 범위와 55°C까지 안정성을 보이며, Ag2+와 Hg2+에 의해 활성이 저해되지만 Co2+와 Mn2+에 의해 활성이 촉진되는 특성을 가진다.

유지수; 백현동; 김수영; 이시경

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자료유형: 학술저널

저자정보: 유지수 (건국대학교) 백현동 (건국대학교) 김수영 (건국대학교) 이시경 (건국대학교)

저널정보: 한국식품영양과학회 한국식품영양과학회지 한국식품영양과학회지 제40권 제9호

발행연도: 2011.9

수록면: 1,321 - 1,327 (7page)

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전화당(invert sugar)을 생산하기 위하여 포도주로부터 분리한 효모가 생산하는 invertase의 특성을 조사한 결과는 다음과 같다. 포도주로부터 분리한 효모는 지방산 분석을 통하여 Saccharomyces cerevisiae JS59로 잠정 동정되었다.
본 균주가 생성하는 invertase를 ammonium sulfate 침전, DEAE-Sephadex A-50, Sephadex G-200 column chromatography 법으로 정제하였을 때 단일성을 보였으며, specific activity가 7620.9 unit/mg, 최종 회수율은 13.9로 약 14배 정제된 효소를 얻었다. 본 효소의 Km 값은 11.5mM이었다.
SDS-PAGE로부터 분자량은 38.5 kDa으로 나타났다. 정제 된 invertase의 최적 pH는 5였고, pH 4에서도 94%의 높은 효소활성을 나타냈으며 4에서 6까지의 pH영역에서 안정하 였고, 55℃에서 최적 활성을 나타내었으며 50℃까지는 안정 하였다. Ag2+와 Hg2+에 의해서 저해를 받았고, Co2+, Mn2+에 의해서는 효소활성이 증가되었으며, 기질과 효소 반응물을 thin layer chromatography로 분석한 결과, 본 효소는 기질인 sucrose를 완전히 분해하여 환원당을 생성함이 확인되었다.

#invertase #Sacchromyces cerevisiae #purification #TLC analysis

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