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번역 개시 인자 eIF1A는 진핵생물에서 43S preinitiation complex 형성을 비롯한 번역 개시 과정의 여러 단계에서 필수적인 역할을 하며, 잘 보존된 oligonucleotide-binding (OB) fold를 가지고 있는 단백질이다. 본 연구진은 이전 연구에서 eIF1A가 RNA annealing 활성을 가지고 있으며 double-stranded RNA에 결합하여 안정된 복합체를 형성한다는 것을 발견한 바 있다. 본 연구에서는 이러한 활성을 나타내는데 필요한 active site를 찾고, 이러한 활성이 효모의 성장에 필수적인 기능인지를 알아보기 위하여 여러 가지 돌연변이를 제조하였다. N-말단과 C-말단은 제거되었지만 완전한 OB-fold를 가지고 있는 eIF1A(ΔT)는 RNA annealing 활성을 보이는 반면, OB-fold에 돌연변이가 도입된 단백질들은 모두 활성이 사라졌다. 또한, R57D 돌연변이를 제외한 모든 OB-fold 돌연변이는 dsRNA에도 결합하지 않았다. 이러한 결과는 eIF1A의 RNA annealing 활성과 dsRNA 결합에는 완전한 OB-fold domain이 필요하다는 것을 의미한다. 돌연변이들이 효모의 성장에 미치는 영향을 조사한 결과, RNA annealing 활성과 효모의 성장은 뚜렷한 연관성이 없었으며, 적어도 R57D와 K94D 경우에는 돌연변이가 성장하지 못하는 원인이 생체 내 eIF1A 단백질의 안정성과 관계있는 것으로 생각된다.
목차
재료 및 방법
결과 및 고찰
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참고문헌
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참고문헌 (21)
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1. [학술지(정기간행물)] - Acker, M.G. / 2009 / Kinetic analysis of late steps of eukaryotic translation initiation / J. Mol. Biol. 385 : 491 ~ 506
2. [학술지(정기간행물)] - Battiste, J.L. / 2000 / The elF1A solution structure reveals a large RNA-binding surface important for scanning function / Mol. Cell 5 : 109 ~ 119
3. [학술지(정기간행물)] - Baudin, A. / 1993 / A simple and efficient method for direct gene deletion in Saccharomyces cerevisiae / Nucleic Acids Res. 14 : 3329 ~ 3330
4. [학술지(정기간행물)] - Cristofari, G / 2002 / The ubiquitous nature of RNA chaperone proteins / Prog. Nucleic Acids Res. Mol. Biol. 72 : 223 ~ 268
5. [학술지(정기간행물)] - Croitoru, V. / 2006 / RNA chaperone activity of translation initiation factor IF1 / Biochimie 88 : 1875 ~ 1882
2. [학술지(정기간행물)] - Battiste, J.L. / 2000 / The elF1A solution structure reveals a large RNA-binding surface important for scanning function / Mol. Cell 5 : 109 ~ 119
3. [학술지(정기간행물)] - Baudin, A. / 1993 / A simple and efficient method for direct gene deletion in Saccharomyces cerevisiae / Nucleic Acids Res. 14 : 3329 ~ 3330
4. [학술지(정기간행물)] - Cristofari, G / 2002 / The ubiquitous nature of RNA chaperone proteins / Prog. Nucleic Acids Res. Mol. Biol. 72 : 223 ~ 268
5. [학술지(정기간행물)] - Croitoru, V. / 2006 / RNA chaperone activity of translation initiation factor IF1 / Biochimie 88 : 1875 ~ 1882
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