Molecular Cloning of the Arginine Biosynthetic Genes from Corynebacterium glutamicum

Q: 이 논문에서 정의한 argB 유전자는 무엇인가?

argB 유전자는 N-아세틸글루타메이트 5-포스포트랜스퍼라제(N-acetylglutamate 5-phosphotransferase) 또는 N-아세틸글루타메이트 키나아제를 암호화하는 유전자이다. 이 효소는 아르기닌 생합성 경로에서 두 번째 반응, 즉 N-아세틸글루타메이트를 N-아세틸글루타밀 인산으로 전환하는 반응을 촉매한다.

Q: Corynebacterium glutamicum의 아르기닌 생합성 유전자들은 어떻게 구성되어 있는가?

연구 결과, Corynebacterium glutamicum의 아르기닌 생합성 유전자들(argACEBDF)은 6.7 kb DNA 단편 내에 군집화되어 있으며, E. coli의 아르기닌 영양요구주를 상보함으로써 그 기능이 확인되었다. 이는 이들 유전자가 클러스터 형태로 조직되어 있음을 시사한다.

Jae-Yeon Chun; Sam-Il Jung; Soon-Young Ko; Mee-Young Park; Soo-Young Kim; Heung-Shick Lee; Choong-Ill Cheon; Kyung-Hee Min; Myeong-Sok Lee

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자료유형: 학술저널

저자정보: Jae-Yeon Chun Sam-Il Jung Soon-Young Ko Mee-Young Park Soo-Young Kim Heung-Shick Lee Choong-Ill Cheon Kyung-Hee Min Myeong-Sok Lee

저널정보: 한국미생물학회 The Journal of Microbiology The Journal of Microbiology Vol. 34 No.4

발행연도: 1996.12

수록면: 355 - 362 (8page)

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Complementation cloning of the argC, E, B, D, F, and G genes in Corynebacterium glutamicum was done by transforming the genomic DNA library into the corresponding arginine auxotrophs of Escherichia coli. Recombinant plasmids containing 6.7 kb and 4.8 kb fragments complementing the E. coli argB mutant were also able to complement the E. coli argC, E, A, D, and F mutants, indicating the clustered organization of the arginine biosynthetic genes within the cloned DNA fragments. The insert DNA fragments in the recombinant plasmids, named pRB1 and pRB2, were physically mapped with several restriction enzymes. By further subcloning the entire DNA fragment containing the functions and by complementation analysis, we located the arg genes in the order of ACEBDF on the restriction map. We also determined the DNA nucleotide sequence of the fragment and report here the sequence of the argB gene. When compared to that with the mutant strain, higher enzyme activity of N-acetylglutamate kinase was detected in the extract of the mutant carrying the plasmid containing the putative argB gene, indicating that the plasmid contains a functional argB gene. Deduced amino acid sequence of the argB gene shows 45%, 38%, and 25% identity to that from Bacillus stearothermophilus, Bacillus subtilis, and E. coli respectively. Our long term goal is genetically engineering C. glutamicum which produces more arginine than a wild type strain does.

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