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본 연구에서는 된장으로부터 혈전용해효소(subtilisin CP-1) 생산 균주를 단리하여 16S rRNA 유전자 분석과 생화학적 분석을 통하여 동정하여 Bacillus sp. CP-1로 명명하였으며, TSB와 LB 배지를 이용하여 혈전용해효소의 생산에 적합한 Bacillus sp. CP-1 배양 배지에 대하여 검토하였다. 그 결과 균주 생육과 균주 유래 전체 단백질의 생산에는 LB 배지가 더욱더 효과적임에 반해 높은 혈전용해효소 활성은 TSB 배지에서 Bacillus sp. CP-1 배양하였을 때 얻어졌다. Bacillus sp. CP-1의 배양 상층액의 fibrin zymography에 의한 분석에서 gel상의 상단 부분에 하나의 명확한 혈전용해 활성을 확인하였으며, 분자량은 약 29-30 kDa으로 추정되며, pH 9.0와 45℃에서 최적의 효소활성을 보였다. 그리고, 기질 특이성 검토에 있어서는 chymotrypsin에 대한 특이적 기질인 Meo-Suc-Arg-Pro-Tyr-pNA (S-2586)에 대하여 가장 높은 기질 특이성을 나타내었다. Subtilisin CP-1단백질의 N-말단 염기서열을 분석한 결과 처음 8개가 AQSVPYGI로 분석되었으며 이 배열은 subtilisin NAT및 E와 동일하였다.
목차
서론
재료 및 방법
결과 및 고찰
감사의 글
References
초록
참고문헌 (21)
참고문헌 신청
1. [학술지(정기간행물)] - Asrup, T. / 1952 / The fibrin plate method for estimating fibrinolytic activity / Arch. Biochem. Biophys 40 : 346 ~ 351
2. [학술지(정기간행물)] - Bradford, M. M. / 1976 / A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding / Anal. Biochem 72 : 248 ~ 252
3. [학술지(정기간행물)] - Engelmann, S. / 1996 / Impaired oxidative stress resistance of Bacillus subtilis sigB mutants and the role of katA and katE / FEMS Microbiol. Lett 145 : 63 ~ 69
4. [학술지(정기간행물)] - Cheng, G. / 2009 / Identification and characterization of a novel spore-associated subtilase from Thermoactinomyces sp. CDF / Microbiology 155 : 3661 ~ 3672
5. [학술지(정기간행물)] - CHOI, NACK-SHICK / 2006 / Identification of Three Extracellular Proteases from Bacillus subtilis KCTC 3014 / Journal of Microbiology and Biotechnology 16 (3) : 457 ~ 464
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