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혈전용해효소를 생산하는 균주 분리를 위해서 우선 한국, 일본 등지에서 모은 21개의 청국장 시료를 준비하였고 총 268개의 균주를 분리하였다. 이 중에서 1% skim milk가 포함된 nutrient agar 배지에서 protease를 생산하는 bacteria를 분리하였고, 이 결과로 22개의 균주가 분리되었다. 균주들은 apiweb을 통해 생화학적 특성에 근거하여 동정하였다. 또한 세균동정을 위해 16S rRNA 염기서열 분석을 수행하였다. 분리된 대부분의 균주는 Bacillus subtilis와 Bacillus amyloliquefaciens였다. 혈전용해효소의 활성은 fibrin plate 방법에 의해 측정되었고 A2-14, A2-20, C1-05, C1-09, F2-01로 명명된 다섯 균주가 선택되었다. 이중에서 A2-20 균주는 강한 혈전용해 활성을 보였고 동정결과 Bacillus amyloliquefaciens에 가까웠다. A2-20 균주에 의해 생산되는 혈전용해효소는 균 상등액을 이용한 gel filtration과 ion exchange chromatography를 거쳐 부분정제 되었다. 부분 정제된 효소의 최적 pH는 7.0이었고, 최적 온도는 35℃였다. 정제된 단백질의 분석은 SDS-PAGE와 zymography로 이루어졌다. 이와 더불어 혈전용해효소의 유전자적 분석도 수행되었으며 A2-20 균주가 생산하는 혈전용해효소의 부분적인 염기서열과 유전적 상동성을 보이는 서열을 규명하였다.
목차
서론
재료 및 방법
결과및 고찰
References
초록
참고문헌 (19)
참고문헌 신청
1. [학술지(정기간행물)] - Astrup, T. / 1952 / The fibrin plate method for estimating fibrinolytic activity / Arch Biochem Biophys 40 : 346 ~ 351
3. [학술지(정기간행물)] - 정영기 / 2005 / Bacillus subtilis BK-17 유래 혈전용해 효소의 특성 / 생명과학회지 15 (6) : 987 ~ 993
4. [학술지(정기간행물)] - Baruah, D. B. / 2006 / Plasminogen activators : A comparison / Vascul Pharmacol 44 : 1 ~ 9
5. [학술지(정기간행물)] - Cho, Y. J. / 2000 / Production and separation of anti-hypertensive peptide during chunggugjang fermentation with Bacillus subtilis CH-1023 / J Korean Soc Agric Chem Biotechnol 43 : 247 ~ 252
6. [학술지(정기간행물)] - CHOI, NACK-SHICK / 2006 / Identification of Three Extracellular Proteases from Bacillus subtilis KCTC 3014 / Journal of Microbiology and Biotechnology 16 (3) : 457 ~ 464
3. [학술지(정기간행물)] - 정영기 / 2005 / Bacillus subtilis BK-17 유래 혈전용해 효소의 특성 / 생명과학회지 15 (6) : 987 ~ 993
4. [학술지(정기간행물)] - Baruah, D. B. / 2006 / Plasminogen activators : A comparison / Vascul Pharmacol 44 : 1 ~ 9
5. [학술지(정기간행물)] - Cho, Y. J. / 2000 / Production and separation of anti-hypertensive peptide during chunggugjang fermentation with Bacillus subtilis CH-1023 / J Korean Soc Agric Chem Biotechnol 43 : 247 ~ 252
6. [학술지(정기간행물)] - CHOI, NACK-SHICK / 2006 / Identification of Three Extracellular Proteases from Bacillus subtilis KCTC 3014 / Journal of Microbiology and Biotechnology 16 (3) : 457 ~ 464
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