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본 연구는 부산 인근의 해수욕장에서 얻은 해수에서 protease를 생산하는 균주를 분리하여 동정하고 균주의 배양학적인 특성과 protease의 효소학적 특성을 확인하였다. 해수에서 분리한 protease를 생산하는 미생물은 16S rDNA sequencing을 통해 Micrococcus sp. PS-1으로 동정하였다. Protease 생산의 최적조건은 2% skim milk와 1% NaCl이 포함된 pH 7.0의 LB배지에 48시간 배양이었다. 효소의 부분정제를 위해 ultrafiltration 과 acetone 침전법을 사용하였고, zymography를 통해 분자량이 35.0 kDa과 37.5 kDa인 protease를 확인하였다. 또한 효소의 최적 활성은 pH 9.0와 37℃에서 나타났고, 효소는 pH 8.0에서 11.0까지, 25℃에서 37℃까지 80% 이상의 효소활성이 유지되어 안정한 것으로 확인되었으며 PMSF, EDTA 처리시 protease가 저해되는 것을 통해 alkaline metallo-serine protease로 확인되었다.
목차
서론
재료 및 방법
결과 및 고찰
References
초록
참고문헌 (26)
참고문헌 신청
Amoozegar, M. A. / 2007 / Production of an extracellular alkaline metallo protease from a newly isolated, moderately halophile, Salinivibrio sp. strain AF-2004 / Microbiol Res 4:369~377
Arulmani, M. / 2007 / Purification and partial characterization of serine protease from thermostable alkalophilic Bacillus laterosporus-AK1 / World J Microbiol Biotechnol 23:475~481
Cavicchioli, R. / 2002 / Low-temperature extremophiles and their applications / Curr Opin Biotechnol 13:253~261
Clark, D. J. / 2000 / Purification and characterization of a unique alkaline elastase from Micrococcus luteus / Protein Expr Purif 18:46~55
Choi, N. S. / 2009 / Mixed-substrate(glycerol tributyrate and fibrin)zymography for simultaneous detection of lipolytic and proteolytic enzymes on a single gel / Electrophoresis 12:2234~2237
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UCI(KEPA) : I410-ECN-0101-2014-470-000267439