꿀벌(Apis mellifera)의 일차세포배양에 가장 적합한 성장액을 선별하는 것이 본 연구의 목적이며, 이를 위해 경기대학교 양봉장에서 육종되고 있는 꿀벌의 알을 수집하였다. 두 가지의 서로 다른 조성을 갖는 멸균액을 사용하여 멸균 능력을 비교하여 그 중 한 종류의 멸균액을 선별하였으며, 멸균액을 사용하여 멸균된 알을 세 종류의 서로 다른 배양액을 사용하여 알을 분쇄한 후, 배양액에서 배양을 시도하였다. 이때 사용한 배양액은 다음과 같다. (1) 배양액 A는 Grace’s insect media를 기본 배양액으로 사용하며, (2) 배양액 B는 Hink"s TNM-FH media를 기본 배양액으로 (3) 배양액 C는 Schneider"s insect media를 기본 배양액으로 각각 사용하는 배양액들이다. 이들 배양액들을 이용하여 세포의 성장을 지속 관찰한 결과, 배양액 A와 B를 사용했을 경우, 세포들은 배양용기의 바닥에 붙지 못하는 상태로 있다고 8일에는 모든 세포가 사멸하였다. 그러나, 배양액 C를 사용했을 경우, 마치 fibroblast와 유사한 형태로 바닥에 붙어서 8일까지 성장을 지속하였으나, 12일 경에는 모든 세포가 사멸하는 것을 확인하였다. 따라서 본 연구팀의 세포배양 조건에서는 Schneider"s insect media가 꿀벌세포의 일차배양을 위한 가장 적합한 배양액이 되며, 향후 이들의 성장이 지속적으로 이루어지도록 하는 연구가 필요할 것을 사료된다.
Here, we select compatible cell growth media for cell culture of honey bee, Apis mellifera. Eggs of honey bee harvested from bee comb were sterilized by using sterilization buffer. Sterilized eggs were dissected with three different growth media; (1) growth media A containing Grace"s insect media, (2) growth media B containing Hink"s TNM-FH media, and (3) growth media C containing Schneider"s insect media. Each media were used as basal media for cell culture. After dissection of eggs with pipetting, the cells were seeded into tissue culture dishes. When we used growth media A and B, the cells did not adhere to bottom of tissue culture dish and all cells were not shown at 8 days due to cell death. However, interestingly, when we used growth media C, the cells adhered to bottom of tissue culture dish and grew with fibroblast-like morphology until 8 days, suggesting that the compatible growth media for cell culture of honey bee is Schneider"s insect media in our culture system. We consider that further experiments are needed to increase cell viability and proliferation.