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본 연구의 목적은 마우스 레이디히 세포인 mLTC-1 세포에 사람 융모성 성선자극호르몬인 hCG를 처리하여 유도되는 소포체 스트레스가 IRE1/XBP1 경로를 통하는지 분석하는 것 이다. 이전 연구에서 hCG처리에 의해 레이디히세포는 소포체 스트레스 매개의 세포자멸사가 유도될 뿐만 아니라 ATF6경로를 조절함으로써 UPR이 성호르몬 합성효소의 발현에 중요한 역할을 하는 것을 증명하였다. UPR 경로는 또한 IRE1/XBP1 경로를 통하여 조절되는 것이 알려져 있지만 레이디히 세포에서 hCG에 의한 소포체 스트레스에 의해 IRE1/XBP1 경로의 활성화가 유도되는지에 대해서는 거의 알려져 있지 않다. mLTC-1세포에서 hCG 처리 후 IRE1/XBP1경로의 활성을 조사하기 위하여, 인산화된 IRE1 단백질 확인하기 위한 western blot, XBP1 mRNA splicing 확인하기 위한 RT-PCR을 수행하였다. 또한 우리는 IRE의 활성을 관찰하기 위하여 소포체 스트레스-활성 표지자(ERAI) construct를 이용하고 이를 형광현미경과 flow cytometry를 이용하여 분석하였다. 결과적으로, hCG 처리에 의해 인산화된 IRE1 단백질의 발현 수준이 두드러지게 증가하였다. F-XBP1-venus/ F-XBP1△DBD-venus가 도입된 mLTC-1 세포에서, hCG 처리에 의해 녹색 형광을 띄는 세포들이 유도되었고 각각 핵/세포질에서 발현하는 것을 확인할 수 있었다. 게다가 hCG 처리 후에 XBP1 mRNA의 splicing 또한 상당히 증가되는 것을 확인 할 수 있었다. 이 결과들을 통하여 종합해 볼 때 레이디히 세포에서 hCG 처리에 의해 유도되는 소포체 스트레스가 IRE1/XBP1 경로의 활성을 유발하는 것을 확인 할 수 있었다.
목차
서론
재료 및 방법
결과
고찰
References
초록
참고문헌 (16)
참고문헌 신청
1. [학술지(정기간행물)] - Calfon, M. / 2002 / IRE1 couples endoplasmic reticulum load to secretory capacity by processing the XBP-1 mRNA / Nature 415 : 92 ~ 96
2. [학술지(정기간행물)] - Do, M. H. / 2009 / GNRH induces the unfolded protein response in the LbetaT2 pituitary gonadotrope cell line / Mol Endocrinol 23 : 100 ~ 112
3. [학술지(정기간행물)] - Fonseca, S. G. / 2011 / Endoplasmic reticulum stress and pancreatic beta-cell death / Trends Endocrinol Metab 22 : 266 ~ 274
4. [학술지(정기간행물)] - Hamamura, K. / 2007 / Stress to endoplasmic reticulum of mouse osteoblasts induces apoptosis and transcriptional activation for bone remodeling / FEBS Lett 581 : 1769 ~ 1774
5. [학술지(정기간행물)] - Iwawaki, T. / 2004 / A transgenic mouse model for monitoring endoplasmic reticulum stress / Nat Med 10 : 98 ~ 102
2. [학술지(정기간행물)] - Do, M. H. / 2009 / GNRH induces the unfolded protein response in the LbetaT2 pituitary gonadotrope cell line / Mol Endocrinol 23 : 100 ~ 112
3. [학술지(정기간행물)] - Fonseca, S. G. / 2011 / Endoplasmic reticulum stress and pancreatic beta-cell death / Trends Endocrinol Metab 22 : 266 ~ 274
4. [학술지(정기간행물)] - Hamamura, K. / 2007 / Stress to endoplasmic reticulum of mouse osteoblasts induces apoptosis and transcriptional activation for bone remodeling / FEBS Lett 581 : 1769 ~ 1774
5. [학술지(정기간행물)] - Iwawaki, T. / 2004 / A transgenic mouse model for monitoring endoplasmic reticulum stress / Nat Med 10 : 98 ~ 102
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