수두바이러스의 정량에 있어서 Solid-overlay Standard Plaque Assay와 Immunofocus Assay의 효용성 비교 연구

이화경; 정용석

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자료유형: 학술저널

저자정보: 이화경 정용석

저널정보: 대한바이러스학회 JOURNAL OF BACTERIOLOGY AND VIROLOGY 大韓바이러스學會誌 제30권 제1호

발행연도: 2000.3

수록면: 61 - 70 (10page)

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Standard plaque assay using agarose-overlay has long been used for titration of many infectious virus particle. Plaque assay for the titration of varicella-zoster virus and its live vaccine requires three intermittent agarose overlay to visualize plaques. Overall procedure of the assay takes at least nine days from virus inoculation and microbe contamination including fungi is frequently accompanied during incubation period. We studied whether an immunofocus assay in conjunction with peroxidase-mediated immunohistochemical reaction may replace the standard plaque assay for the virus titration by comparing the two methods. A linear relationship was observed between number of foci and virus dilution. The number of foci in a given dilution of virus appeared a little higher than counted plaques formed in standard plaque assay. Independent titration results obtained from two assay methods for a given dilution of virus demonstrated a strong correlation (r=0.99). Foci of virus infected cells as revealed by the enzyme reaction could be counted either 4 days post-infection (p.i.) under low magnification (40X) microscopy, or 6 days p.i. by naked eye observation. Larger size of cell cuture plate, virus adsorption at 35。C, and 10% FBS in diluent appeared to be better conditions for the assay. Immunofocus assay will be an effective and dependable titration method for varicella-zoster virus and its live vaccine in place of the standard plaque assay in respect to accuracy, costs, and experimental convenience.

#Varicella-zoster virus #Immunofocus assay #Plaque assay #Titration

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