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논문 기본 정보

자료유형
학술저널
저자정보
저널정보
한국식물생명공학회 Journal of Plant Biotechnology Journal of Plant Biotechnology 제35권 제4호
발행연도
2008.1
수록면
275 - 280 (6page)

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One of the limitation for Agrobacterium-mediated transformation via organogenesis from cotyledon explants routinely in cucumber is the production of chimeric plants. To overcome the limitation, Agrobacterium-mediated transformation system via somatic embryogenesis from hypocotyl explants of cucumber (c.v., Eunsung) on the selection medium with paromomycin as antibiotics was developed. The hypocotyl explants were inoculated with Agrobacterium tumefaciens strain EHA101 carrying binary vector pPTN290; then were subsequently cultured on the following media: co-cultivation medium for 2 days, selection medium for 5 x 14 days, and regeneration medium. The T-DNA of the vector (pPTN290) carried two cassettes, Ubi promoter-gus gene as reporter and 35S promoter-nptII gene conferring resistance to paromomycin as selectable agent. The confirmation of stable transformation and the efficiency of transformation was based on the resistance to paromomycin indicated by the growth of putative transgenic calli on selection medium amended with 100 mg/L paromomycin, and GUS gene expression. Forty eight clones (5.2%) with GUS gene expressed of 56 callus clones with resistance to paromomycin were independently obtained from 928 explants inoculated. Of 48 clones, transgenic plants were only regenerated from 5 clones (0.5%) at low frequency. The histochemical GUS assay in the transgenic seeds (T1) also revealed that the gus gene was successfully integrated and segregated into each genome of transgenic cucumber.

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참고문헌 (24)

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/ 1999 / Roa-Rodriguez C, Nottenburg C, NptII gene in combination with paromomycin as a selective agent. Patent EP 927765A1 google schola Cardoza V. / 2004 / Brassica biotechnology: progress in cellular and molecular biology / In Vitro Cell Dev-Plant 40 : 542 ~ 551 google schola Chee P. P. / 1990 / Transformation of Cucumis sativus tissue by Agrobacterium tumefaciens and the regeneration of transformed plants / Plant Cell Rep 9 : 245 ~ 248 google schola Cho M. A. / 2005 / Development of transgenic maize (Zea may L.) using Agrobacterium tumefaciensmediated transformation / Kor J Plant Biotechnol 32 : 91 ~ 95 google schola Cho M. A. / 2005 / The use of glufosinate as a selective marker for the transformation of cucumber (Cucumis sativus L.) / Kor J Plant Biotechnol 32 : 161 ~ 165 google schola

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