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논문 기본 정보
- 자료유형
- 학술저널
- 저자정보
- 발행연도
- 2011.1
- 수록면
- 26 - 36 (11page)
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연구목적: 본 연구는 in vitro 상에서 치수, 치은, 치주인대 세포를 neuropeptide (substance P, Calcitonin gene related peptides (CGRP))및 inflammatory cytokine (TNF-α) 으로 자극 시 matrix metalloproteinase (MMPs)의 생성 및 발현을 관찰한 것으로 치아와 치아 주변 조직에 염증이 존재할 경우 neuropeptide 및 inflammatory cytokine과 치아 경조직혹은 치조골의 remodeling에 중요한 역할을 하는 matrix metalloproteinase (MMPs)와의 관계를 규명하고자 하였다.
연구 재료 및 방법: 시편으로는 우식이 없는 건전한 제3대구치(n = 10)를 사용하였으며, 발거 후 즉시 Phosphate buffered saline (PBS)에 보관하고 치아에서 치은과 치주인대 조직을 채취하였다. 치아를 종축으로 절단하고 치수 조직을 채취하여조각으로 분리한 후 시편을 PBS에서 세 번 세척하였다. Plate에 치수, 치은, 치주인대 시편 조각을 위치시켜 Dulbecco’s Modified Eagle Medium (DMEM)을 첨가하여 세포를 배양하였다. 치수, 치은, 치주인대 세포를 culture dish에서 confluence에도달할 때 까지 배양하여 Fetal Bovine Serum (FBS)가 포함되지 않은 배지로 교환하여, 37℃에서 24시간 동안배양한 후 Phosphate buffered saline (PBS)로 1회 세척하고 Substance P (10-8 M, 10-5 M)가 포함된 배양액과 Mock (배양액만 포함됨)으로 4시간, 24시간동안 자극하였다. CGRP (10-6 M)을 함유한 배양액 및 TNF-α(2 ng/mL)를 포함한배양액으로 각각 24시간동안 세포를 자극하였다. 각각 다른 농도의 TNF-α(2 ng/mL, 10 ng/mL, 100 ng/mL)를 포함한배양액으로 24시간 동안 세포를 자극 한 후 RNase protection assay 및 Enzyme linked immunosorbent assay를 시행하였다.
결과: SP와 CGRP는 치수, 치은, 치주인대 세포의 MMPs발현에 관여 하지 않았다. TNF-α로 24시간 자극 시 치수, 치은,치주인대 세포에서 MMP-1,-12, -13의 발현을 증가시켰다. 반면, TNF-α는 치수, 치은, 치주인대 세포들에서 TIMP-3의발현을 감소시켰다. 서로 다른 농도의 TNF-α(2 ng/mL, 10 ng/mL, 100 ng/mL)로 24시간 자극 시 MMP-1과 MMP-13의 발현이 증가하였다.
결론: 치아와 치아 주변 조직에 염증이 존재 시 TNF-α가 증가함에 따라 치수, 치은, 치주인대로부터의 치아의 경조직 혹은치조골의 remodeling에 관여하는 matrix metalloproteinase (MMPs)가 중요한 역할을 하는 것으로 사료된다.
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#MMPs)
#Substance P
#Tumor necrosis factor-alpha
#Gingival fibroblasts
#Matrix metalloproteinases
#MMPs)
#Periodontal ligament fibroblasts
#Pulp fibroblasts
#Substance P
#Tumor necrosis factor-alpha -Received 6 October 2005
#revised 17 October 2005
#accepted 11 June 2010-
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참고문헌 (22)
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Birkedal -Hansen H / 1993 / Matrix metalloproteinases; a review / Crit Rev Oral Biol Med 4 : 197 ~ 250
Coil J / 2004 / Proinflammatory cytokine profile in pulp fibroblasts stimulated with Lipopolysaccharide and Methyl Mercaptan / J Endod 30 : 88 ~ 91
Daphna-Iken D / 1995 / Interleukin-1βinduces interstitial collagenase gene expression and protein secretion in renal mesangial cells / Am J Physiol 269 : F381 ~ 7
Dean DD / 1989 / Evidence for metalloproteinases and metalloproteinases inhibitor imbalance in human osteoarthritic cartilage / J Clin Invest 84 : 678 ~ 85
Douglas DA / 1997 / Computational sequence analysis of the tissue inhibitor metalloproteinases family / J Protein Chem 16 : 237 ~ 55
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