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In a cDNA microarray experiment using Cy3 andCy5 as labeling agents, particularly for the direct design,cDNAs from some genes incorporate one dye more efficientlythan the other, which is referred to as the gene-specific dyebias. Dye-swaps, in which two dyes are switched on replicatearrays, are commonly used to control the gene-specific dyebias. We developed a simple procedure to extract the genespecificdye bias information from a partial dye swap experiment.We detected gene-specific dye bias by identifying outliers inan X-Y plane, where the X axis represents the average logratiofrom two sets of dye swap pairs and the Y axis exhibitsthe average log ratio of four forward labeled arrays. We usedthis information for detecting differentially expressed genes,of which the additionally detected genes were validated byreal-time RT-PCR.

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