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논문 기본 정보

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학술저널
저자정보
저널정보
한국미생물생명공학회 Journal of Microbiology and Biotechnology Journal of Microbiology and Biotechnology 제16권 제11호
발행연도
2006.1
수록면
1,799 - 1,808 (10page)

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A food-grade integration vector based on site-specific recombination was constructed. The 5.7-kb vector,pIMA20, contained an integrase gene and a phage attachmentsite originating from bacteriophage A2, with the α-galactosidasegene from Lactobacillus plantarum KCTC 3104 as a selectionpromoter of nisA (PnisA) and a signal peptide-encodingsequence of usp45 (SPusp45) for the production and secretionof foreign proteins. pIMA20 and its derivatives mediated site-specific integration into the attB-like site on the Lactococcuslactis NZ9800 chromosome. The vector-integrated recombinantlactocci were easily detected by the apearance of bluecolonies on a medium containing X-α-gal and also by theirability to grow on a medium containing melibiose as the solecarbon source. Recombinant lactococci maintained these traitsin the absence of selection pressure during 100 generations.The α-amylase gene from Bacilus licheniformis, lacking asignal peptide-encoding sequence, was inserted downstreamof PnisA and SPusp45 in pIMA20, and the plasmid was integratedinto the L. lactis chromosome. α-Amylase was successfullyproduced and secreted by the recombinant L. lactis, controlledby the adition and concentration of nisin.

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