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논문 기본 정보

자료유형
학술저널
저자정보
저널정보
한국미생물생명공학회 Journal of Microbiology and Biotechnology Journal of Microbiology and Biotechnology 제28권 제12호
발행연도
2018.1
수록면
2,113 - 2,120 (8page)

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이 논문의 연구 히스토리 (2)

2018

Generation of monoclonal antibodies recognizing cross-reactive materials 197 (CRM197) and development of an ELISA method for quantitation of CRM197 in human sera
김다인 2018.01 학위논문
Generation of a Human Monoclonal Antibody to Cross-Reactive Material 197 (CRM197) and Development of a Sandwich ELISA for CRM197 Conjugate Vaccines
김다인 ,  윤혜선 ,  김상규 외 8명 Journal of Microbiology and Biotechnology 2018.01 학술저널

초록· 키워드

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Cross-reactive material 197 (CRM197) is a non-toxic mutant of diphtheria toxin containing a single amino acid substitution of glycine 52 with glutamic acid. CRM197 has been used as a carrier protein for poorly immunogenic polysaccharide antigens to improve immune responses. In this study, to develop a sandwich ELISA that can detect CRM197 and CRM197 conjugate vaccines, we generated a human anti-CRM197 monoclonal antibody (mAb) 3F9 using a phage-displayed human synthetic Fab library and produced mouse anti-CRM197 polyclonal antibody. The affinity (KD) of 3F9 for CRM197 was 3.55 nM, based on Bio-Layer interferometry, and it bound specifically to the B fragment of CRM197. The sandwich ELISA was carried out using 3F9 as a capture antibody and the mouse polyclonal antibody as a detection antibody. The detection limit of the sandwich ELISA was <1 ng/ml CRM197. In addition, the 3F9 antibody bound to the CRM197-polysaccharide conjugates tested in a dose-dependent manner. This ELISA system will be useful for the quantification and characterization of CRM197 and CRM197 conjugate vaccines. To our knowledge, this study is the first to generate a human monoclonal antibody against CRM197 and to develop a sandwich ELISA for CRM197 conjugate vaccines.

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Galazka AM / 1995 / Diphtheria: changing patterns in the developing world and the industrialized world / Eur. J. Epidemiol 11:107~117 google schola Valiakina TI / 2009 / Production and characteristics of monoclonal antibodies to the diphtheria toxin / Bioorg. Khim 35:618~628 google schola Collier RJ / 1975 / Diphtheria toxin: mode of action and structure / Bacteriol. Rev 39:54~85 google schola Porro M / 1980 / Immunogenic correlation between cross-reacting material (CRM197) produced by a mutant of Corynebacterium diphtheriae and diphtheria toxoid / J. Infect. Dis 142:716~724 google schola A M Pappenheimer J. / 1977 / Diphtheria Toxin / Annu. Rev. Biochem 46:69~94 google schola

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