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자료유형
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저자정보
저널정보
대한산부인과학회 Obstetrics & Gynecology Science Obstetrics & Gynecology Science 제47권 제7호
발행연도
2004.1
수록면
1,348 - 1,354 (7page)

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목적 : 본 연구는 생쥐 배포기 배아인 배포를 이용하여 두 가지 동결보호제로 유리화 동결 보존 및 해동 후 배아의 생존율과 발달률을 비교하고자 시행하였다. 연구 방법 : 배포를 획득하기 위하여 4-6주된 ICR계 계통의 암컷과 8-12주령의 수컷 생쥐를 이용하여 PMSG와 hCG로 과배란 유도한 후 수정 48시간 째에 난관을 통해 2세포기의 수정란을 회수하여 3일 동안 10% Serum Substitute Supplement (SSS)가 첨가된 Human Tubal Fluid (HTF) 배양액으로 체외배양 시켰으며, 배포기로 성장한 배아를 선별하여 동결하였다. 동결시 사용되는 동결보호제로는 40% ethylene glycol, 18% ficoll, 0.5 M sucrose가 함유된 EFS40용액과 20% ethylene glycol, 20% DMSO, 10% 1,3-butanediol이 함유된 VS용액을 사용하였다. 각각의 용액에 노출시켜 배포에 대한 독성을 점검한 후에, EFS40용액은 3단계의 동결법으로 유리화동결 후 0.5 M sucrose의 농도를 5단계로 낮춰주면서 해동을 실시하였고, VS용액은 2단계의 동결법으로 유리화동결 후 1.0 M의 trehalose를 이용하여 해동을 실시하고, 회수된 배포의 회수율 및 생존율과 부화 배포로의 배아 발달률인 부화율을 비교하였다. 결과 : 각각의 용액에 동결없이 노출 후 발달을 유도한 결과 EFS40군에서는 95%의 생존율과 100%의 부화율을 보인 반면, VS군에서는 100%의 생존율과 87.5%의 부화율을 보였다. 각 동결보호제를 이용하여 동결보존 및 해동시킨 후 그 발달률을 관찰해 본 결과, 먼저 회수율에서 EFS40군은 73.7%, VS군은 66.5%를 보였고, 생존율은 24시간 배양 후 EFS40군은 80.5%, VS군은 66%, 48시간 배양 후 EFS40군은 69%, VS군은 58.3%의 결과를 보였다. 부화율은 24시간 배양 후 EFS40군에서는 20.7%, VS군에서는 0%, 48시간 배양 후 EFS40군은 33.3%, VS군은 1.9%를 보여 EFS40군이 VS군에 비해 생존율과 부화율에서 각각 유의하게 높았다. 결론 : 이러한 결과로 미루어 보아 생쥐 배포의 유리화동결을 위한 동결보호제로는 VS용액보다 EFS40용액이 더 적합할 것으로 사료된다
#생쥐배포 #EFS40용액 #VS용액 #유리화동결 #Mouse blastocyst #EFS40 solution #VS solution #Vitrification

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[학술지( google schola / 1972 / Survival of mouse embryos frozen to -196℃ and -296℃ 178 : 411 ~ 414 google schola / 1983 / Human pregnancy following cryopreservation, thawing and transfer of an eight-cell embryo 305 : 707 ~ 709 google schola / 1983 / Incidence of multiple pregnancy after in-vitro fertilization and embryo transfer 2 : 537 ~ 540 google schola / 1984 / Analysis of slow-warming injury of mouse embryos by cryomicroscopical and physicochemical methods 21 : 106 ~ 121 google schola

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