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저자정보
이효종 (경상대학교 수의과대학, 동물의학연구소) 강태영 (구엘프 대학교 생명의학과) 노규진 (경상대학교 수의과대학, 동물의학연구소) 채영진 (서울대학교 수의과대학 및 농생명공학부) 이항 (서울대학교 수의과대학 및 농생명공학부) 최상용 (경상대학교 수의과대학, 동물의학연구소)
저널정보
한국동물번식학회 한국수정란이식학회지 한국수정란이식학회지 제15권 제2호
발행연도
2000.1
수록면
157 - 165 (9page)

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The efficiency of transgenic livestock production could be improved by early screening of transgene-integration and sexing of embryos at preimplantational stages before trasferring them into recipients. We examined the effciency of multiplex PCR analysis for the simultaneous confirmation of the trasgene and sex during the preimplantational development of bovine embryos and the possibility of green fluorescent protein(GFP) gene as a non-invasive marker for the early screening of transgenic embryos. The GFP gene was microinjected into the male pronuclei of bovine zygotes produced in vitro. The injected zygotes were co-cultured in TCM-199 containing 10% FCS with boving oviductal epithelial cells in a 5% CO2 incubator. Seventeen(13.0%) out of 136 gene-injected bovine zygotes developed by multiplex PCR analysis and the expression of GFP was detected by observing green fluorescence in embryos under a fluorescent microscope. Eight(67%) of 12 embryos at 2-cell to blastocyst stage were positive in the PCR analysis, but only two(11.8%) of 17 blastocysts expressed the GFP gene. Their sex was determined as 7 female and 5 male embryos by the PCR analysis. The results indicate that the screening of GFP gene and sex in bovine embryos by PCR analysis and fluorescence detection could be a promisible method for the preselection of transgenic embryos.

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