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자료유형
학술저널
저자정보
이재원 (서울대학교 농업생명과학대학 산림과학부) 양인 (서울대학교 농업생명과학대학 산림과학부) 五十嵐圭日子 (동경대학교 농업생명과학대학원) 鮫島正浩 (동경대학교 농업생명과학대학원) 최인규 (서울대학교 농업생명과학대학 산림과학부)
저널정보
한국목재공학회 목재공학(Journal of the Korean Wood Science and Technology) 목재공학 제33권 제4호
발행연도
2005.1
수록면
45 - 52 (8page)

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백색부후균 Phanerochaete chrysosporium으로부터 유래한 Manganese peroxidase (mnp5)를 methylotrophic yeast인 Pichia pastoris에서 이종 발현을 하였다. 이종발현으로부터 얻어진 단백질은 클로닝으로부터 예상되어지는 분자량보다 높은 분자량인 45 kDa으로 나타났다. 이것은 mnp5가 가지고 있는 glycosylation site에 의한 것이며, N-linked hyperglycosylation이 효소 활성에 영향을 미치는지를 site direct mutation에 의해 확인하였다. Sodium dodesyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE)와 Coomassie Brilliant Blue (CBB) 염색에 의해 분자량을 확인한 결과 약 37 kDa으로 나타났으며, 효소활성을 측정한 결과 glycosylation이 효소 활성에 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다. 따라서 본 연구로부터 P. pastoris에서 mnp5의 이종발현이 성공적으로 이루어졌으며 이러한 결과로부터 heme을 포함하고 있는 단백질의 이종발현 생산의 가능성을 보여주었다.
#Phanerochaete chrysosporium #manganese peroxidase #methylotrophic yeast #Pichia pastoris #glycosylation

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