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저자정보
서보윤 (국립농업과학원 작물보호과) 박창규 (국립한국농수산대학 산업곤충과) 정진교 (국립식량과학원 재배환경과) 조점래 (국립농업과학원 작물보호과) 이관석 (국립농업과학원 작물보호과) 김광호 (국립농업과학원 작물보호과)
저널정보
한국응용곤충학회 한국응용곤충학회지 한국응용곤충학회지 제57권 제4호
발행연도
2018.1
수록면
393 - 399 (7page)

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고리매개등온증폭법(LAMP)으로 흰등멸구를 특이적으로 구별해낼 수 있는 프라이머 세트(WBPH-65)가 핵내 ITS2영역의 전체염기서열(KC417469.1)을 바탕으로 설계 제작되었다. WBPH-65는 총 6개의 프라이머, F3 (18 bp), B3 (18 bp), FIP (43 bp), BIP (40 bp), LF (21 bp), LB (25 bp)로 구성되는데, 전체 합한 길이가 165 bp이다. WBPH-65를 흰등멸구, 벼멸구 및 애멸구의 게놈 DNA와 $65^{\circ}C$에서 60분간 고리매개등온증폭 반응시켰을 때, 흰등멸구 시료에서만 증폭 산물들이 관찰되었다. $65^{\circ}C$에서 WBPH-65와 흰등멸구 게놈 DNA의 양과 반응시간을 달리하여 형광반응을 관찰하였을 때 40분 반응에서는 10과 100 ng DNA에서, 60분 반응에서는 0.01, 0.1, 1, 10, 100 ng DNA에서 발광여부가 명확히 구별되었다. 그러나 20분과 30분 반응에서는 준비된 모든 DNA 양에서 발광여부 구별이 어려웠다. 한편, WBPH-65에서 LF와 BF 프라이머를 뺀 경우 60분 반응에서는 벼멸구, 애멸구 뿐만 아니라 흰등멸구의 게놈 DNA에서도 발광되지 않았다. 본 연구 결과로부터 WBPH-65가 60분 이내 반응에서 흰등멸구를 특이적으로 구별하기 위해서는 6개의 프라이머가 모두 필요하며 최소한 벼멸구와 애멸구를 구별해낼 수 있음을 확인하였다.
#흰등멸구 #프라이머 #고리매개등온증폭 #종 판별

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참고문헌 (19)

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Asche, M. / 1990 / The delphacid genus Sogatella and related groups: a revision with special reference to rice-associated species (Homoptera: Fulgoroidea) / Syst. Entomol 15:1~42 google schola Blaser, S. / 2018 / From laboratory to point of entry:development and implementation of a loop-mediated isothermal amplification (LAMP)-based genetic identification system to prevent introduction of quarantine insect species / Pest Manag. Sci 74:1504~1512 google schola Choi, B. H. / 2018 / Development of a highly accurate and sensitive diagnostic tool for pyrethroid-resistant chimeric P450 CYP337B3 of Helicoverpa armigera using loop-mediated isothermal amplification / Arch. Insect Biochem. Physiol 99:e21504 google schola Fekrat, L. / 2015 / Application of the LAMP assay as a diagnostic technique for rapid identification of Thrips tabaci (Thysanoptera: Thripidae) / J. Econ. Entomol 108:1337~1343 google schola Huang, C-. G. / 2009 / Rapid identification of the mediterranean fruit fly (Diptera:Tephritidae) by loop-mediated isothermal amplification / J. Econ. Entomol 102:1239~1246 google schola

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