인문학
사회과학
자연과학
공학
의약학
농수해양학
예술체육학
복합학
DBpia AI
AI 에이전트
AI 아이디어
AI 리더
AI 뷰어
Citeasy
크롬 서지관리 다운로드
개인구독
소속 기관이 없으신 경우, 개인 정기구독을 하시면 저렴하게
논문을 무제한 열람 이용할 수 있어요.
지원사업
학술연구/단체지원/교육 등 연구자 활동을 지속하도록 DBpia가 지원하고 있어요.
커뮤니티
연구자들이 자신의 연구와 전문성을 널리 알리고, 새로운 협력의 기회를 만들 수 있는 네트워킹 공간이에요.
이용 5
초록·키워드
염증 반응은 외부로부터 침입한 병원성 물질이나 조직적 손상으로 나타나는 방어 작용 중 하나로 체내 항상성을 유지하기 위한 필수적인 반응이지만, 염증 반응 조절의 이상은 조직 손상을 유발할 수 있어 류마티즘 관절염, 동맥경화, 암 및 알츠하이머 등의 다양한 질환과 관련되어 있다고 알려져 있다. 본 실험 물질인 glabralactone은 당귀 (Angelica sinensis (Oliv.) Diels)로부터 분리된 coumarin 계열의 성분이다. 당귀는 전통적으로 부인병, 피로, 빈혈, 고혈압에 효능을 지닌 약물로 사용되어 왔다. Inducible nitric oxide synthase (iNOS)는 대표적인 염증 유발 단백질로, 본 논문에서는 iNOS를 타깃으로 한 새로운 천연물 유래 염증 치료제 개발을 목표로 실험을 진행하였다. 실험결과 Lipopolysaccharide (LPS)로 염증 반응을 유도한 마우스 유래 RAW 264.7 세포에서 glabralactone은 IC50 값이 11.6 μM로서 뛰어난 NO 생성 저해 효능을 보였으며, iNOS의 단백질 발현을 농도 의존적으로 억제하였다. 또한 glabralactone에 의해 염증 유발 사이토킨인 Interleukin-1β (IL-1β), Tumor necrosis factor-α (TNF-α) 및 Interferon-β (IFN-β)의 단백질 및 유전자의 발현이 억제되었다. Glabralactone은 염증 반응의 중요한 신호전달 물질인 NF-κB의 전사능(transcriptional acitivity)을 농도 의존적으로 억제하였으며, NF-κB의 활성화에 관여하는 IκB의 분해를 억제하고, IκB의 분해에 관여하는 IKK의 발현을 억제하였다. 또한 NF-κB의 소단위인 p50과 p65의 핵내 단백질 발현 억제 및 NF-κB-DNA binding 활성의 억제를 통해 glabralactone이 NF-κB 신호 경로를 불활성화시킴을 확인하였다. 또한 IRF3, STAT-1, JAK-1의 단백질 발현 억제와 poly(I:C)로 유도된 iNOS 단백질의 발현 억제를 통해 glabralactone의 NF-κB 불활성화 기전이 TRIF 경로 조절을 통해 나타남을 확인하였다. 또한 내부 면역 반응에서 중요한 역할을 하는 miR-155 의 억제 및 그 일차 타깃인 SHIP-1의 발현 조절을 통해 glabralactone이 miR-155를 타깃으로 하여 항염증 활성을 나타냄을 확인하였다. Glabralactone의 항염증 활성을 carrageenan으로 유도한 족부종 실험 동물 모델에서 확인한 결과 농도 의존적인 부종 감소를 확인할 수 있었다.
추가적으로 동물 조직에서 염증 관련 단백질 발현을 확인한 결과 iNOS 및 IL-1β의 발현을 억제함을 알 수 있었다. 이상의 결과들로부터, glabralactone에 의한 LPS로 유도된 iNOS의 발현억제는 TRIF를 매개하는 신호전달 경로의 조절과, miR-155의 억제를 통해 나타남을 알 수 있었다. 따라서, glabralactone은 천연물 유래 항염증제 개발에 선도물질로서의 가능성이 크다고 여겨진다.
추가적으로 동물 조직에서 염증 관련 단백질 발현을 확인한 결과 iNOS 및 IL-1β의 발현을 억제함을 알 수 있었다. 이상의 결과들로부터, glabralactone에 의한 LPS로 유도된 iNOS의 발현억제는 TRIF를 매개하는 신호전달 경로의 조절과, miR-155의 억제를 통해 나타남을 알 수 있었다. 따라서, glabralactone은 천연물 유래 항염증제 개발에 선도물질로서의 가능성이 크다고 여겨진다.
목차
- 초 록 ................................................................................ i목 차 .............................................................................. iii그 림 목 차 ..................................................................... v표 목 차 ..................................................................... viiI. 서 론 ..................................................................................................... 1II. 실험 재료 및 방법................................................................................. 5A. 실험 재료 ........................................................................................... 51. 시약 ................................................................................................ 52. 시험물질 ......................................................................................... 63. 세포 배양 ........................................................................................ 6B. 실험 방법 ........................................................................................... 81. NO 생성 저해 활성 검색 (iNOS assay) ....................................... 82. 세포 독성 실험 (MTT assay) ...................................................... 93. Western blot analysis ................................................................... 94. Reverse transcription real-time PCR .......................................105. Reporter gene (SEAP) assay ....................................................126. Nuclear extraction ......................................................................127. NF-?B DNA binding assay ........................................................138. MicroRNA-155 determination ...................................................149. 실험동물 .......................................................................................1410. Carrageenan 으로 유도한 족부종 실험 동물 모델 ....................1411. 염증 조직에서의 생화학적 ex vivo 분석 ...................................15III. 실험 결과 ...........................................................................................171. NO 생성에 대한 glabralactone 의 영향 ..........................................172. iNOS 및 COX-2 단백질 발현에 대한 영향 ....................................203. Pro-inflammatory cytokine 발현에 대한 영향 ............................224. LPS 유도에 의한 NF-κB 전사능 (transcriptional activity)에미치는 영향 .........................................................................................255. NF-κB signaling 에 미치는 영향 ..................................................276. MAPKs signaling 에 대한 영향 .......................................................317. TRIF pathway 에 대한 영향 ............................................................338. microRNA-155 에 대한 영향 .......................................................389. Carrageenan 으로 유도한 족부종 실험 동물 모델에서의 영향 .......41고 찰...............................................................................................44참 고 문 헌 ................................................................... 47Abstract........................................................................ 51
최근 본 자료 전체보기
