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논문 기본 정보
- 자료유형
- 학위논문
- 저자정보
- 지도교수
- 李昊燮
- 발행연도
- 2018
- 저작권
- 원광대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.
이용수3
초록· 키워드
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고혈압은 우리나라 만성 질환 중 하나로 혈관 구조적인 변화를 통하여 기능 이상을 초래하게 되며, 장기적인 고혈압은 뇌혈관이 막히거나 터지는 뇌혈관 질환, 심장근육에 혈액이 충분히 공급되지 못하는 허혈성 심장질환 등의 고혈압성 질환을 유발한다. 고혈압의 유병률은 꾸준히 증가하고 있는 상황이지만, 이에 대한 뚜렷한 치료책이 부족하기 때문에 고혈압 치료 및 예방에 대한 연구의 필요성이 증대되고 있고, 고혈압 치료제의 장기 복용에 따른 부작용 부담을 덜기 위해 천연물 소재의 한약제제(韓藥製劑)에 대한 관심이 커지고 있다.
이에 따라, 본 연구는 L-NAME (L-NG-Nitro arginine methyl ester)에 의해 고혈압이 유발된 백서에서 삼출건비탕의 효과를 알아보기 위하여 진행되었다. 대조군을 제외한 모든 군은 L-NAME 40 mg/kg/day를 3주간 처리하여 고혈압을 유발하였으며, 그 이후 olmetec (olmesartan medoxomil, 양성대조군) 및 삼출건비탕을 투여하여 효과를 확인했다. 실험동물은 Sprague-Dawley 계 수컷 백서를 사용하였으며 각 그룹은 다음과 같다. 1) 대조군, 2) L-NAME 유도 고혈압 백서, 3) L-NAME 유도 고혈압 백서 + 10 mg/kg/day olmetec, 4) L-NAME 유도 고혈압 백서 + 100 mg/kg/day 삼출건비탕, 5) L-NAME 유도 고혈압 백서 + 200 mg/kg/day 삼출건비탕 등 5개 군으로 이루어졌다.
수축기 혈압을 측정한 결과, L-NAME 유도 고혈압군에서 대조군에 비하여 혈압이 크게 증가하였고 삼출건비탕군에서 유의성 있게 혈압이 감소되었다. 각 군의 백서에서 흉부 대동맥을 분리하여 acetylcholine 처리에 따른 혈관 이완률을 측정했을 때, L-NAME 유도 고혈압군에서 대조군에 비해 혈관 이완률이 현저히 감소하였고, 삼출건비탕 투여군에서 유의성 있는 혈관이완 개선효과를 확인할 수 있었다. 흉부 대동맥에서 각 군의 cGMP 생성양을 측정 했을 때, L-NAME 군에서 대조군에 비해 cGMP 생성이 감소하였고 삼출건비탕 투여군에서 L-NAME 유도 고혈압 군에 비해 현저한 증가를 확인하였다. 각 군에서 백서의 흉부대동맥을 분리하여 hematoxylin & eosin 염색을 통하여 혈관의 형태학적 변화를 확인한 결과, 삼출건비탕 투여군에서 고혈압군에 비하여 혈관 두께가 감소하였다. 면역 염색법을 통해 확인 했을 때, 삼출건비탕 투여군에서 고혈압 군에 비하여 ET-1의 발현이 감소하였고 eNOS의 발현이 증가하였다. Western blot법을 통하여 단백발현양을 확인 했을 때, 삼출건비탕을 투여한 군에서 고혈압 군에 비해 p-eNOS와 p-Akt의 발현양이 증가하였다. 혈중 알부민 농도, 혈액요소질소 (BUN), 혈중 크레아티닌, 뇨 삼투질 농도를 측정한 결과, L-NAME 군과 비교했을 때 삼출건비탕을 경구 투여한 군에서 유의성 있는 개선 효과를 확인 하였다.
이와 같은 결과로 보아 삼출건비탕은 L-NAME로 고혈압을 유발시킨 백서에서 eNOS/NO/cGMP 신호전달경로를 통한 혈압 강하 및 혈관 손상 개선에 효과를 확인하였다. 또한 신장의 기능 개선에 영향을 주는 것으로 관찰되어, 향후 전통 한약처방을 이용한 심혈관계 질환 및 신장 기능 개선 연구에 유용한 정보를 제시해 줄 수 있을 것으로 사료된다.
이에 따라, 본 연구는 L-NAME (L-NG-Nitro arginine methyl ester)에 의해 고혈압이 유발된 백서에서 삼출건비탕의 효과를 알아보기 위하여 진행되었다. 대조군을 제외한 모든 군은 L-NAME 40 mg/kg/day를 3주간 처리하여 고혈압을 유발하였으며, 그 이후 olmetec (olmesartan medoxomil, 양성대조군) 및 삼출건비탕을 투여하여 효과를 확인했다. 실험동물은 Sprague-Dawley 계 수컷 백서를 사용하였으며 각 그룹은 다음과 같다. 1) 대조군, 2) L-NAME 유도 고혈압 백서, 3) L-NAME 유도 고혈압 백서 + 10 mg/kg/day olmetec, 4) L-NAME 유도 고혈압 백서 + 100 mg/kg/day 삼출건비탕, 5) L-NAME 유도 고혈압 백서 + 200 mg/kg/day 삼출건비탕 등 5개 군으로 이루어졌다.
수축기 혈압을 측정한 결과, L-NAME 유도 고혈압군에서 대조군에 비하여 혈압이 크게 증가하였고 삼출건비탕군에서 유의성 있게 혈압이 감소되었다. 각 군의 백서에서 흉부 대동맥을 분리하여 acetylcholine 처리에 따른 혈관 이완률을 측정했을 때, L-NAME 유도 고혈압군에서 대조군에 비해 혈관 이완률이 현저히 감소하였고, 삼출건비탕 투여군에서 유의성 있는 혈관이완 개선효과를 확인할 수 있었다. 흉부 대동맥에서 각 군의 cGMP 생성양을 측정 했을 때, L-NAME 군에서 대조군에 비해 cGMP 생성이 감소하였고 삼출건비탕 투여군에서 L-NAME 유도 고혈압 군에 비해 현저한 증가를 확인하였다. 각 군에서 백서의 흉부대동맥을 분리하여 hematoxylin & eosin 염색을 통하여 혈관의 형태학적 변화를 확인한 결과, 삼출건비탕 투여군에서 고혈압군에 비하여 혈관 두께가 감소하였다. 면역 염색법을 통해 확인 했을 때, 삼출건비탕 투여군에서 고혈압 군에 비하여 ET-1의 발현이 감소하였고 eNOS의 발현이 증가하였다. Western blot법을 통하여 단백발현양을 확인 했을 때, 삼출건비탕을 투여한 군에서 고혈압 군에 비해 p-eNOS와 p-Akt의 발현양이 증가하였다. 혈중 알부민 농도, 혈액요소질소 (BUN), 혈중 크레아티닌, 뇨 삼투질 농도를 측정한 결과, L-NAME 군과 비교했을 때 삼출건비탕을 경구 투여한 군에서 유의성 있는 개선 효과를 확인 하였다.
이와 같은 결과로 보아 삼출건비탕은 L-NAME로 고혈압을 유발시킨 백서에서 eNOS/NO/cGMP 신호전달경로를 통한 혈압 강하 및 혈관 손상 개선에 효과를 확인하였다. 또한 신장의 기능 개선에 영향을 주는 것으로 관찰되어, 향후 전통 한약처방을 이용한 심혈관계 질환 및 신장 기능 개선 연구에 유용한 정보를 제시해 줄 수 있을 것으로 사료된다.
목차
- I. 서 론 1II. 실험 재료 및 방법 51. 재료 51.1. 실험 동물 51.2. 시약 및 재료 62. 방법 82.1. 혈압의 측정 82.2. 흉부대동맥의 분리 82.3. 혈관 장력의 측정 92.4. 단백질의 분리 및 정량 92.5. Western blot 분석 102.6. 신장 기능 측정 112.7. 혈 중 albumin, BUN 및 creatinine 측정 11 2.8. 혈관 조직의 hematoxylin & eosin (H&E) 염색 112.9. 혈관 조직의 면역조직 염색 122.10. 통계처리 14III. 실험 결과 151. 삼출건비탕의 혈압에 미치는 영향 152. 삼출건비탕의 음수량, 요량, 요 삼투질 농도에 미치는 영향163. 삼출건비탕의 요 중 albumin 농도에 미치는 영향 164. 삼출건비탕의 혈 중 BUN, albumin 및 creatinine에 미치는 영향 175. 삼출건비탕의 ACh 및 SNP에 의한 혈관 이완에 미치는 영향176. 삼출건비탕의 cGMP 생성에 미치는 영향 187. 삼출건비탕의 흉부대동맥의 형태학적 변화에 미치는 영향188. 삼출건비탕의 흉부대동맥의 eNOS, ET-1의 발현에 미치는 영향 189. 삼출건비탕의 eNOS, Akt 1/2/3, 및 ET-1의 단백질 발현에 미치는 영향 1910. 삼출건비탕의 체중과 좌심방, 좌심실, 우심방, 우심실 및 신장 무게에 미치는 영향 19IV. 고 찰 34V. 결 론 43
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