지원사업
학술연구/단체지원/교육 등 연구자 활동을 지속하도록 DBpia가 지원하고 있어요.
커뮤니티
연구자들이 자신의 연구와 전문성을 널리 알리고, 새로운 협력의 기회를 만들 수 있는 네트워킹 공간이에요.
논문 기본 정보
- 자료유형
- 학위논문
- 저자정보
- 지도교수
- 이승관
- 발행연도
- 2019
- 저작권
- 고려대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.
이용수6
이 논문의 연구 히스토리 (2)
- 이 논문의 후속연구가 궁금하신가요?
- 연관 학술논문 또는 학술발표를 통해 보다 발전된 연구결과를 확인하실 수 있습니다.
- 이 논문의 연구 히스토리 확인하기
초록· 키워드
오류제보하기
중간엽줄기세포 (MSC)의 면역 조절 효과는 줄기세포 치료에서의 치료 효과를 높이고 있다. MSC의 면역 조절 메커니즘은 내재적 및 외재적요인등으로 이루어진다. 최근의 연구에 따르면 MSC에서 분비 된 사이토카인의 동적 발현은 T 세포 분화에서 두드러지게 나타나는 FoxP3의 발현을 조절함으로써 T 세포 기능과 성숙을 조절한다는 것을 보여 주었다. 특히 태반 유래 중간엽 줄기 세포 (PD-MSCs)는 FoxP3 발현을 통한 T 세포 기능 및 성숙에 강력한 면역 조절 효과를 나타낸다. 따라서, 우리는 태반유래 중간엽줄기세포( PD-MSCs) 및 골수 유래 중간엽 줄기세포 (BM-MSCs)와 함께 배양 된 활성화 된 T 세포에서 FoxP3의 발현을 비교 하였다. 또한 태반유래 또는 골수유래 중간엽줄기세포의 T 세포 증식과 사이토카인 발현에 미치는 영향을 분석하였으며, siRNA에 의해 FoxP3발현이 억제된 T세포를 이용한 PD-MSCs 의 면역조절기능을 확인하였다. 그 결과, PD-MSC 및 BM-MSC는, 말초 혈액 T세포를 CD4+ CD25+ Foxp3+ (Treg) T 세포로의 분화를 촉진하는 것을 확인하였다. 흥미롭게도, T세포를 PD-MSC 와 함께 배양한 결과 CD4 + CD25 + FoxP3 + Treg 세포의 집단은 BM-MSC 또는 WI38 세포 와 함께 배양 된 집단에 비하여 유의하게 높은 증가를 보였다. ( p <0.05, p <0.001). 그리고 PD-MSCs 및 BM-MSCs유래의 염증성 및 항-염증성 사이토카인에 의한 광범위한 면역조절기능의 변화를 볼 수 있었다. 본 연구결과는 PD-MSCs가 FoxP3의 발현을 조절함으로써 T 세포를 통한 면역 조절 효과가 있음을 시사한다.
또한 MicroRNA-33a의 죽상동맥경화의 조기진단 마커로의 활용성 및 miR-33a의 ABCA1 단백질 발현 억제능 평가를 위하여 인간 혈장과 대식세포 배양액에서 miR-33a와 ATP-binding cassette A1(ABCA1)단백질 발현 측정을 실시하였다. 우선 정상과 지질이상증을 가지고 있는 사람들의 혈청을 분리하여 -20℃에 보관하였다. 그리고 지질검사 결과를 기반으로 정상군, 동맥경화위험군, 치료군 각18개의 혈청샘플을 선택하여 연구에 활용하였다. 보다 정확한 세 실험군으로의 분류를 위하여 의사소견, 처방기록, 치료병력, 지질검사결과를 참고하였다. 최종적으로 수집된 54개의 검체로 부터 miR-33a와 ABCA1의 혈청농도를 측정하였다. 세 개 실험군에서의 비교결과, miR-33a는 동맥경화 위험군에서 정상군에 비해 5.01배 높았다. 그리고 anti-miR33으로 처리된 거품세포에서는 miR-33a발현이 감소하고 ABCA1발현은 증가한 것으로 나타났다. 이러한 결과를 통하여 miR-33a의 발현증가는 콜레스테롤 축적을 야기하고 대식세포에서의 ABCA1 발현을 억제하여 혈관벽에 죽상동맥경화를 유발하는 것으로 추정할 수 있다. Plasma microRNA 33a의 발현증가가 죽상동맥경화 유발과의 관련성을 보고자 했던 본 연구에서, microRNA-33a는 죽상동맥경화 진단을 위한 바이오 마커로의 활용 가능성을 보여 주었다.
또한 MicroRNA-33a의 죽상동맥경화의 조기진단 마커로의 활용성 및 miR-33a의 ABCA1 단백질 발현 억제능 평가를 위하여 인간 혈장과 대식세포 배양액에서 miR-33a와 ATP-binding cassette A1(ABCA1)단백질 발현 측정을 실시하였다. 우선 정상과 지질이상증을 가지고 있는 사람들의 혈청을 분리하여 -20℃에 보관하였다. 그리고 지질검사 결과를 기반으로 정상군, 동맥경화위험군, 치료군 각18개의 혈청샘플을 선택하여 연구에 활용하였다. 보다 정확한 세 실험군으로의 분류를 위하여 의사소견, 처방기록, 치료병력, 지질검사결과를 참고하였다. 최종적으로 수집된 54개의 검체로 부터 miR-33a와 ABCA1의 혈청농도를 측정하였다. 세 개 실험군에서의 비교결과, miR-33a는 동맥경화 위험군에서 정상군에 비해 5.01배 높았다. 그리고 anti-miR33으로 처리된 거품세포에서는 miR-33a발현이 감소하고 ABCA1발현은 증가한 것으로 나타났다. 이러한 결과를 통하여 miR-33a의 발현증가는 콜레스테롤 축적을 야기하고 대식세포에서의 ABCA1 발현을 억제하여 혈관벽에 죽상동맥경화를 유발하는 것으로 추정할 수 있다. Plasma microRNA 33a의 발현증가가 죽상동맥경화 유발과의 관련성을 보고자 했던 본 연구에서, microRNA-33a는 죽상동맥경화 진단을 위한 바이오 마커로의 활용 가능성을 보여 주었다.
목차
1. 국문 요약 12. 서론 33. 재료 및 방법 73.1 세포 배양 73.2 Anti-CD3 및 Anti-CD28을 이용한 T 세포 활성화 73.3 활성화 된 T 세포와 기저 세포 의 공동 배양 83.4 AMAXA 시스템을 이용한 FoxP3 발현의 억제 83.5 T 세포 증식 분석 83.6 RNA 분리 및 정량 핵산 역전사 효소 중합반응 (qRT-) PCR 분석 93.7 유세포 FACS분석 93.8 Bio-Plex 사이토카인 분석 93.9 miRNA 추출용 검체의 선택과 실험군 선택 103.10 miRNA 초기검체선택과 혈장분리 103.11 54개의 miRNA 혈장검체의 최종선택 103.12 혈청검체와 세포배양액에서 miRNA의 분리 113.13 혈장과 거품세포 배양액에서의 miR-33a 정량 113.14 혈장과 거품세포 배양액에서의 ABCA1 정량측정 123.15 THP-1 세포배양과 대식세포분화 및 ox-LDL 제조 123.16 miRNA 형질도입 및 거품세포 제조 133.17 지질축적 확인을 위한 Oil-red O 염색 133.18 통계 분석 144. 결과 154.1 MSCs 와의 공배양을 통한 말초 T세포의 증식억제 154.2 MSCs 의 Naiive 말초 T세포에서의 CD4+CD25+FoxP3+ Treg 세포로의 분화 154.3 FoxP3의 사이토카인 조절로 T세포에 대한 면역조절능 164.4 동맥경화 위험군에서의 혈장 miR-33a 유의적 상승 174.5 치료군에서의 혈장 ABCA1 단백질의 감소 184.6 혈장 miR-33a와 LDL, 총콜레스테롤과의 상관성 184.7 miR-33a의 ABCA1 단백질 발현억제로 인한 세포지질 배출능 저하 184.8 miR-33a 유사 올리고핵산 처리 거품세포에서의 miR-33a발현 194.9 ROC곡선을 이용한 miR-33a의 죽상동맥경화 진단에서의 바이오마커로 활용가능성 195. 고찰 216. 부록 247. 참고문헌 558. 영문 요약 66
최근 본 자료
댓글(0)
0