시호(Bupleurum falcatum L.) 뿌리 추출물의 피부 보습, 장벽 기능 강화 및 피부상태 개선 효과 :The Moisturizing, Skin Barrier-reinforcing and Skin Condition-improvement Effects of Bupleurum Falcatum L. Root Extract

이주연

자료유형: 학위논문

저자정보: 이주연 (건국대학교, 건국대학교 대학원)

지도교수: 배승희

발행연도: 2020

저작권: 건국대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

이용수26

초록· 키워드

본 연구는 화장품 소재중 하나로서 Bupleurum falcatum L. root (시호 뿌리) 추출물의 피부 보습, 피부장벽기능 증진 및 피부상태 개선 효과를 세포효력실험과 인체적용시험을 통해 검증하는데 목적이 있다. Bupleurum falcatum L. root 추출물의 세포효력을 검증하기 위하여 세포 생존율, quantitative real-time PCR을 실시하였다. HaCaT은 0.05, 0.1, 0.2% 농도의 Bupleurum falcatum L. root 추출물에서 독성이 없었으며, nHDFs은 0.05, 0.1, 0.2, 0.5% 농도에서 독성이 없었다. HA 합성에 관여하는 HAS1, HAS2, HAS3 유전자 분석 결과 HaCaT 세포에서 추출물 처리 48시간 후 HAS1, HAS3의 mRNA 발현양은 농도의존적으로 증가되었고 nHDF 세포에서 24시간 후 HAS2의 mRNA 발현이 농도의존적으로 증가됨을 확인하였다. HaCaT 세포에서 Aquaporin3(AQP3) mRNA 발현양은 큰 차이를 나타내지 않아 AQP3의 보습 개선 효능은 약한 것으로 확인되었다. 초기 분화표지자인 involucrin에서 mRNA의 발현이 현저히 증가하였으며, 후기 분화표지자인 filaggrin에서는 mRNA발현이 증가되지 않아 효과가 약한 것으로 확인하였다. 이러한 결과는 Bupleurum falcatum L. root 추출물이 HAS1, HAS2, HAS3에서 HA의 생성을 촉진시키고, involucrin에서 피부장벽 강화에 도움을 주는 것으로 보인다.
Bupleurum falcatum L. root 추출물이 피부 개선 효능을 검증하기 위하여 인체적용시험을 실시하였다. 시험물질은 4주 동안 사용하였으며, 이중맹검법으로 진행하였다. 안면 피부 수분 함유량 개선, 수분 분포 개선, 경피수분손실량 개선, 윤기 개선, 피부결 개선, 눈가 주름 개선, 탄력 개선 평가를 실시하였다. 피부 수분 함유량, 수분 분포도, 피부 윤기 모두 증가하는 변화를 나타내어 피부 보습 개선에 효과가 있었으며, 경피수분손실량도 개선되어 피부장벽의 가장 중요한 기능의 수분 유지 효과가 있는 것으로 나타났다. 또한 피부 거칠기를 감소시켜 피부결 수치가 상승하였고, 눈가주름 감소 효과, 피부탄력 회복 효과가 나타났다.
따라서 Bupleurum falcatum L. root 추출물이 피부의 보습, 피부장벽 기능 증진, 피부상태 개선 효과를 검증하였고 Bupleurum falcatum L. root 추출물이 보습 화장품 소재의 하나로서 충분한 사용가치가 있다고 판단된다.

This study attempted to verify the moisturizing, skin barrier-reinforcing and skin condition-improvement effects of Bupleurum falcatum L. root extract as a cosmetic ingredient through cell potency assays and clinical trials. To verify the cell potency of Bupleurum falcatum L. root extract, cell viability assays and quantitative real-time PCR were performed. In terms of HaCaT, no toxicity was found at 0.05%, 0.1% and 0.2% Bupleurum falcatum root extract. According to HAS1, HAS2 and HAS3 gene analysis, which involves in HA synthesis, the amount of mRNA expression in HAS1 and HAS3 increased in a dose-dependent manner after 48 hours from the treatment of the extract in HaCaT. In Normal human dermal fibroblasts cells, the mRNA expression of HAS2 started to rise in a dose-dependent fashion 24 hours later. The Aquaporin3 (AQP3) mRNA expression in HaCaT cells did not reveal much difference, confirming weak moisturizing improvement in AQP3. In the initial differentiation marker ‘involucrin’, the mRNA expression considerably increased. In the late marker ‘filaggrin’, on the contrary, the mRNA expression did not rise, confirming little effects. The above results reveal that Bupleurum falcatum L. root extract is helpful in accelerating HA formation in HAS1, HAS2 and HAS3 and reinforcing skin barrier. To verify its skin improvement effects, clinical trials were also performed. For this, a double-blind experiment was performed with the test material for four weeks. In addition, the improvement of the following was assessed: face moisture contents, moisture distribution, trans-epidermal water loss (TEWL), skin gloss, texture, eye wrinkles and elasticity. In fact, it showed moisture improvements by increasing moisture contents, moisture distribution and skin shininess. The TEWL has also improved, keeping the skin barrier moist and soft. Furthermore, skin texture levels increased by reducing skin roughness, showing wrinkle reduction and elasticity recovery effects. In sum, the moisturizing, skin barrier-reinforcing and skin condition-improvements effects of Bupleurum falcatum root extract has been proven, and it is anticipated that it would be useful as a moisturizing cosmetic material.

#시호뿌리추출물 #각질형성세포 #인간진피섬유아세포 #피부보습 #피부장벽 #화장품원료

제1장 서론 1
제2장 연구방법 6
제1절 시호뿌리추출물의 세포효력실험 6
1. 시료의 추출 6
2. 세포 배양 6
3. 시료 처리 7
4. 세포생존율 7
5. RNA 추출과 cDNA 제조 8
6. Quantitative real-time PCR 9
제2절 시호뿌리추출물 함유크림의 인체적용시험 10
1. 연구대상자 10
2. 시험기간 및 방법 12
3. 시험물질로 사용된 크림제형 화장품제조 12
4. 피부 상태 측정 방법 14
5. 피부이상평가 17
6. 통계분석방법 17
제3장 연구 결과 18
제1절 시호뿌리 추출물의 세포효력실험 결과 18
1. 각질형성세포 내 시호뿌리추추물의 세포독성 및 보습관련유전자 발현 분석 18
1) 세포 생존율 분석 18
2) Hyaluronic acid synthase1 (HAS1)의 mRNA 발현 분석 20
3) Hyaluronic acid synthase3 (HAS3)의 mRNA 발현 분석 22
4) Aquaporin3 (AQP3)의 유전자 발현 분석 24
5) Filaggrin의 유전자 발현 분석 26
6) Involucrin의 유전자 발현 분석 28
2. 인간진피섬유아세포 내 시호뿌리추출물의 세포독성 및 보습관련 유전자발현 분석 30
1) 세포 생존율 분석 30
2) Hyaluronic acid synthase2 (HAS2)의 mRNA 발현 분석 32
제2절 시호 뿌리 추출물 함유크림의 인체적용시험 결과 34
1. 피시험자 기본정보 34
2. 안면 피부 수분 함유량 개선 효과 35
3. 안면 피부 수분 분포 개선 효과 39
4. 안면 피부 경피수분손실량 개선 효과 47
5. 안면 피부 윤기 개선 효과 51
6. 안면 피부결 개선 효과 55
7. 눈가 주름 개선 효과 63
8. 안면 피부 탄력 개선 효과 71
제4장 고찰 76
제5장 결론 80
참고문헌 81
부 록. 심의결과통보서 92
국문초록 93

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