Isolation and antimicrobial susceptibility of Lawsonia intracellularis from pigs with proliferative enteropathy :돼지증식성장병증 돼지에서 Lawsonia intracellularis 분리 및 항생제 감수성

고상억

자료유형: 학위논문

저자정보: 고상억 (충북대학교, 충북대학교 대학원)

지도교수: 이완규

발행연도: 2020

저작권: 충북대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

이용수6

초록· 키워드

돼지증식성장병증 (Porcine proliferative enteropathy, PPE) 또는 증식성출혈성장병증 (Proliferative hemorrhagic enteropathy, PHE)을 유발하는 원인체는 세포내 증식 세균인 Lawsonia (L.) intracellularis 이다.
본 실험에서는 2018년과 2019년에 국내 돼지농장에서 PPE 임상증상을 나타내는 돼지에서 2개의 L. intracellularis 균 (CBNU009 & JBNU010)을 분리하였다. L. intracellularis는 돼지 회장 점막의 출혈 병소에서 분리하였으며, 랫드 소장 세포 (Rat small intestinal cells, IEC-18)에 DMEM (Dulbecco Modified Eagle’s Medium)과 7 %의 소 태아 혈청 (Fetal bovine serum, FBS)을 첨가하여 순수 배양하였다.
분리된 2개의 L. intracellularis 균에 대한 항생제 감수성 패턴을 확인하기 위하여 13 종류의 항생제에 대하여 최소발육억제농도 (Minimum inhibitory concentration, MIC)를 측정하였다. 그 결과 플로르페니콜 (Florfenicol)과 린코마이신 (Lincomycin)은 다른 항생제보다 가장 높은 저항성을 나타내고 있음이 확인되었다. 아목시실린 (Amoxicillin), 페니실린 G (Penicillin G), 클로르테트라사이클린 (Chlortetracycline), 옥시테트라사이클린 (Oxytetracycline), 틸미코신 (Tilmicosin), 티아물린 (Tiamulin) 그리고 타이로신 (Tylosin)은 이번 항생제 감수성 실험에서는 분리된 2개의 균주에 대하여 중등도의 저항성을 나타내었다. 플로르퀴롤론 (Fluroquinolones) 계통의 항생제 [엔로플록삭신 (Enrofloxacin) & 마보플로삭신 (Marbofloxacin)] 그리고 콜리스틴 (Colistin)과 틸바로신 (Tylvalosin)은 최근 분리된 2개의 L. intracellularis 균에 대하여 다른 항생제들보다 낮은 농도에서 MIC를 나타내는 것이 확인되어 가장 높은 감수성을 나타내었다.
이번 실험에서 확인된 L. intracellularis 에 대한 항생제의 MIC 결과는 향후 돼지 농장에 발현된 PPE와 PHE를 콘트롤 하는데 유용하게 사용되어 질 것으로 사료된다.

주요어:
Lawsonia intracellularis (L. intracellularis), 돼지증식성장병증 (Porcine proliferative enteropathy, PPE), 증식성출혈성장병증 (Proliferative hemorrhagic enteropathy, PHE), 최소발육억제농도 (Minimum inhibitory concentration, MIC).

#Lawsonia intracellularis (L. intracellularis) #Porcine proliferative enteropathy (PPE) #Proliferative hemorrhagic enteropathy (PHE) #Minimum inhibitory concentration (MIC)

I. INTRODUCTION ------------------------------------------------ 1
II. MATERIALS AND METHODS ------------------------------ 7
1. Source materials ----------------------------------------------- 7
2. Preparation of genomic DNA -------------------------------- 7
3. Detection of L. intracellularis by PCR ---------------------- 8
4. Preparation of IEC-18 cells ----------------------------------- 10
5. Infection and culture ------------------------------------------ 11
6. Harvest -------------------------------------------------------- 11
7. Immunocytochemistry (ICC) ----------------------------------- 12
8. Preparation of antimicrobials --------------------------------- 12
9. L. intracellularis isolates. ------------------------------------- 13
10. Antimicrobials susceptibility testing -------------------------- 13
III. RESULTS ----------------------------------------------------- 15
1. Detection of L. intracellularis by PCR ----------------------- 15
2. Monitoring of cell culture ------------------------------------ 17
3. Intracellular and extracellular MICs ------------------------ 19
IV. DISCUSSION ------------------------------------------------ 23
V. CONCLUSION ------------------------------------------------ 27
VI. 국문초록 ------------------------------------------------------ 28
VII. REFERENCES ------------------------------------------------- 30

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