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(원광대학교, 원광대학교 일반대학원)

지도교수
김송백
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청포축어탕(淸胞逐瘀湯, Cheongpochukeo-tang, CCT)은 급성 내지 만성 골반염증성질환을 치료하기 위해 만들어진 膈下逐瘀湯 가감방으로, 본 연구에서는 LPS로 유도된 RAW 264.7 cell과 moues 모델에서 청포축어탕의 항염증 효과를 확인하고자 하였다.
먼저 CCT의 RAW 264.7 cell에 대한 세포 독성을 확인한 결과 CCT는 세포 독성을 나타내지 않았으며, NO 생성에 있어서 0.1, 0.5, 1 ㎎/㎖ 농도에서 농도 의존적으로 NO 생성을 억제하였다(P<0.05). 그러나 CCT 농도 2 ㎎/㎖에서는 자체적인 NO 증가를 보여 이후 실험에서는 배제하였다.
LPS로 유도된 RAW 264.7 cell에서 염증성 cytokine의 mRNA 발현을 측정한 결과, CCT는 mRNA 수준에서 IL-1β, IL-6, TNF-α의 발현을 모두 유의미하게 억제하였다(P<0.05). 또한 CCT가 MAPKs의 인산화와 NF-κB의 활성을 억제하는 것을 관찰할 수 있었다.
LPS로 유도된 mouse 모델에서 CCT는 120 h 시점에 0.1 ㎎/㎏ 투여군 20%, 0.2 ㎎/㎏ 투여군 50%의 생존율을 나타냈으며, mouse 혈청 cytokine의 생성을 유의하게 억제하였다(P<0.05). 또한 LPS 처리한 mouse의 간 조직에서 염증과 출혈 정도를 유의하게 억제하였고(P<0.05), 간 cytokine의 mRNA 발현도 유의하게 감소시켰다(P<0.05).
실험 결과 CCT는 in-vitro와 in-vivo 모두에서 유의한 항염증 효과를 나타냈으며, 이를 바탕으로 골반염증성질환에서 염증 반응의 완화와 치료에 활용할 수 있을 것이라 사료된다.

목차

  1. Ⅰ. 緖 論 1
    Ⅱ. 材料 및 方法 3
    1. 재료 3
    1) 약재 3
    2) 시약 4
    3) 세포주 4
    4) 실험동물 4
    2. 연구 방법 5
    1) 약물 추출 5
    2) MTT assay 5
    3) Nitric Oxide 농도의 측정 6
    4) RNA 분리 및 Quantitative RT-PCR 6
    5) Western blot analysis 7
    6) mouse 모델 실험군 설정 8
    7) mouse 혈청의 cytokine 정량 8
    8) mouse 간 조직의 조직학적 관찰 및 간의 cytokine mRNA 정량 9
    3. 통계 9
    Ⅲ. 結 果 10
    1. RAW 264.7 cell에 대한 세포 독성 10
    2. NO 생성에 미치는 영향 11
    3. mRNA 수준에서 IL-1β, IL-6, TNF-α 생성에 미치는 영향 13
    4. MAPKs 및 NF-κB의 활성에 미치는 영향 15
    5. mouse 모델의 생존율에 미치는 영향 17
    6. mouse 혈청 cytokine 생성에 미치는 영향 18
    7. mouse 간 조직 손상에 미치는 영향 20
    8. mouse 간 cytokine mRNA 발현에 미치는 영향 22
    Ⅳ. 考 察 23
    Ⅴ. 結 論 28

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