말 인공수정에서 발정동기화와 정액보존방법이 임신율에 미치는 효과 :Effects of Estrus Synchronization and Semen Preservation Methods on Pregnancy Rate in Artificial Insemination of Horses

권수현

자료유형: 학위논문

저자정보: 권수현 (경상국립대학교, 경상국립대학교 대학원)

지도교수: 오상현

발행연도: 2023

저작권: 경상국립대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

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초록· 키워드

국내 말의 생산 체계와 관련하여 우량 승용마 생산을 위해서는 국외의 우수한 자원의 동결정액 또는 수정란을 도입하여 국내 실정에 맞게 개량, 증식하는 연구가 필요하며, 국산기술개발을 위한 말 정액 동결기술, 암말의 발정 및 배란동기화기술, 인공수정 임신율 향상 연구 및 망아지 육성체계 개발에 대한 기초 연구가 필요하다. 따라서 본 연구에서는 말 인공수정의 기초라고 할 수 있는 정액 보존 기법, 발정/배란 동기화, 각각에 따른 임신율을 비교 분석하였다.
씨수말에 따른 정자의 운동성 조사에서 씨수말 3마리 중에서 1마리에서 정액 보존 72시간에서 96시간 사이에 Total motility(TM)과 Progressive motility(PM)이 급격히 저하되는 것으로 나타났다. 또한 희석제에 따른 정자의 운동성 조사에서는 EZ-mixin 희석제에 비하여 INRA 희석제의 TM과 PM이 높았다. 따라서 동일한 환경에서 정액을 채취-희석-냉장 보존 하더라도 씨수말과 희석제에 따른 차이가 있었고, 이러한 결과는 향후 임신율에도 영향을 미칠 것으로 예상되므로, 모든 씨수말이 인공수정용 정액을 제공하기는 어렵고, 인공수정 이전에 단계적인 선발이 필요한 것으로 판단된다.
정장 함유에 따른 정자의 운동성을 조사한 결과에서 정장의 혼합 비율이 낮을수록 정자의 운동성이 높아지는 경향이었고, 특히 정장 제거군(W/O)은 냉장 보존 96시간에서도 TM과 PM 비율이 높게 유지되었다. 또한 희석 24시간 이후에는 정장 비율이 25% 또는 정장제거군(W/O group)의 생존율이 높았다. 따라서 채취 후 24시간 이내에 사용할 경우는 1:2 희석 비율이 경제적이며 임신율이 보장될 것으로 판단되며, 24시간 이상 장기 보존에는 정장을 1:4 또는 완전히 제거한 정액을 사용하는 것이 효과적일 것으로 판단된다.
Cidr-plus 삽입법, Regumate 급여법 및 150 mg 프로제스테론 + 10 mg 에스트라디올 혼합 투여법을 이용한 발정동기화 처리는 말의 발정주기 조절이 모두 가능하였지만, 질내에 삽입하는 Cidr-plus는 인력과 사용이 간편하였으
나 질의 염증과 오염의 원인이 되었고, 경구용 프로제스테론은 매일 일정한 시간에 일정량을 급여해야하는 문제점이 있었고, 프로제스테론과 에스트라디올 혼합제는 주사 후 근육부위의 부종이 장기간 지속되는 단점이 발생되었다. 또한 배란동기화를 위하여 PGF2α 또는 hCG 투여 후 혈중 프로제스테론 농도를 조사한 결과 공히 투여 후 농가가 감소하여 배란이 적절히 유도되는 것으로 조사되었다.
인공수정에 따른 임신율 조사에서 배란유도가 자연발정에 비하여 임신율이 높았고, 정액 보존 방법에 따라 희석정액과 냉장정액의 임신율은 차이가 없었으나 동결정액은 낮은 경향이었다. 한편 계절별 및 냉장보존 시간에 따른 임신율의 차이는 없었다. 특히, 본 연구 결과에서 냉장 장기 보존 정액(48시간 이후)에서도 안정적인 임신율이 확인되어 향후 인공수정 산업화에 기여할 수 있을 것으로 생각된다.

In order to produce high-quality horseback riding in relation to the production system of Korean horses, research is essential to improve and multiply based on the Korea’s situation by introducing frozen semen or fertilized eggs of excellent foreign resources, and fundamental research is needed on horse semen freezing technology, estrus and ovulation synchronization of female horses, research on the improvement of artificial insemination pregnancy rate, and the development of a colt fostering system.
Therefore, sperm preservation techniques, estrus/ovulation synchron ization, and pregnancy rates based on each were compared and analyzed, which are the basis of horse artificial insemination in this study. In the motility survey of sperm by stallions, it was discovered that in one out of three stallions, total motility (TM) and progressive motility (PM) decreased rapidly between 72 and 96 hours of semen preservation. Moreover, in the motility survey of sperm according to diluents, the TM and PM of INRA diluents were higher than that of EZ-mixin diluents. Therefore, even if semen was collected, diluted, and refrigerated in the identical environment, there was a difference between the stallions and the diluent, and since these results are expected to influence the pregnancy rate in the future, it is difficult for all stallions to provide semen for artificial insemination, and it is believed that phased selection is essential prior to artificial insemination.
As a result of examining the motility of sperm according to the content of the seminal plasma, the lower the mixing ratio of the seminal plasma, the higher the motility of the sperm, and in particular, the seminal plasma removal group (W/O) maintained a high TM and PM ratio even for 96 hours of refrigeration. Moreover, after 24 hours of dilution, the seminal plasma ratio was 25% or the survival rate of the seminal plasma removal group (W/O group) was high. Therefore, in case it is used within 24 hours of collection, the 1:2 dilution ratio is considered economical and the pregnancy rate is guaranteed, and it is believed that it will be influential to use 1:4 or fully removed semen for long-term preservation for more than 24 hours.
Estrus synchronization using the Cidr-plus insertion method, Regumate feeding method, and 150mg progesterone + 10mg estradiol combination were all able to control the horse''s estrus cycle, but The Cidr-plus inserted into the vagina was very easy to use for manpower, but it caused inflammation and contamination of the vagina, and oral progesterone had an issue of having to pay a certain amount at a particular time every day, and the progesterone and estradiol mixture had a disadvantage of swelling in the muscle area for a long time after injection. In addition, as a result of examining the concentration of testosterone in the blood after injecting PGF2α or hCG for ovulation synchronization, it was discovered that the concentration rate decreased after the entire injection, properly inducing ovulation.
According to the pregnancy rate survey following artificial insemination, the pregnancy rate of ovulation induction was higher than that of natural estrus, and the pregnancy rate of diluted and refrigerated semen was not different based on the semen preservation method, but the frozen semen tended to be low. On the other hand, there was no difference in pregnancy rate according to season and refrigeration time. In particular, in the results of the study, a stable pregnancy rate is also confirmed in refrigerated long-term storage semen (after 48 hours), which is expected to contribute to the industrialization of artificial insemination in the future.

#말 #인공수정

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