Structure, Function, and Evolution of Thioredoxin from the Psychrophilic Bacterium Sphingomonas sp. :호내성 세균 Sphingomonas sp. 티오레독신의 구조, 기능 및 진화 연구

누엔안투

추천

검색

자료유형: 학위논문

저자정보: 누엔안투 (대구대학교, 대구대학교 대학원)

지도교수: 이창우

발행연도: 2023

저작권: 대구대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

이용수1

초록· 키워드

티오레독신(Trx)는 잘 보존된 산화환원 단백질로 Trx-접힘 구조를 가진다. 이 연구의 목적은 Trx의온도적응에 있어서 방향족 아미노산 짝의 영향을 밝히는 것이며, 연구대상으로 호냉성 세균인Sphingomonas sp.의 Trx (SpTrx)와 상온 세균인 대장균의 Trx (EcTrx)를 이용한다. SpTrx는 α-나선 1과α-나선 3 사이에 크기가 큰 Trp11-Phe69 짝을 가지지만, EcTrx는 크기가 작은 Phe12-Tyr70 짝을가지고 있다. SpTrx의 방향족 아미노산을 크기가 작은 Phe-Tyr 또는 Phe-Phe로 치환하면 단백질의녹는점과 요소에 의한 단백질 풀림이 감소하고, 구조유연성이 증가한다. 이들 SpTrx 변이체에서 Ala65잔기를 Thr로 치환하면 Phe-Tyr 짝보다 Phe-Phe 짝을 가진 변이체의 구조가 더 불안정해진다. 제작한SpTrx 변이체는 모두 인슐린 환원능력이 야생형보다 감소하였다. 반대로 EcTrx에서는 크기가 큰 Trp잔기가 존재할 때 구조가 불안정해졌으며, Trp-Tyr 짝 보다는 Trp-Phe 짝을 가진 변이체가 더 영향을받았다. 반면에 EcTrx에서 Asp-Thr 사이의 수소결합과 Phe-Tyr 짝은 구조 밀도를 증가시켜서 콤팩트한구조형성에 기여하였다. 이 결과는 상온 Trx에서 Thr을 Ala로 치환시키면(EcTrx에서 Thr66 잔기) α-나선 3이 불안정지고 이로 인해 SpTrx에서와 같이 호냉성 Trx에서 크기가 큰 방향족 아미노산이 α-나선1과 α-나선 3 사이에 위치하여 구조 밀도가 감소함을 의미한다. SpTrx와 EcTrx 모두에서 방향족아미노산 짝과 이에 인접한 Thr 잔기는 서로 간에 영향을 주었다. 본 연구의 결과는 Trx의 온도적응이해에 기여하며 Trx 단백질이 다양한 온도 조건에서 최적 효소활성을 나타낼 수 있음을 제시한다.

I. Introduction 1
II. Materials and methods 3
1. Materials. 3
2. Structural analysis and multiple sequence alignment. 3
3. Site-directed mutagenesis. 4
4. Expression and purification of SpTrx WT and mutant proteins. 4
5. Fluorescence spectroscopy. 5
6. Protein thermal shift analysis. 6
7. Far-UV Circular dichroism (CD) spectroscopy. 6
8. Insulin reduction assay using SpTrx WT and mutants. 7
III. Results 8
1. Expression and purification of recombinant SpTrx wild-type (WT) and mutants. 8
2. Thermal stability of SpTrx WT and mutants. 8
3. Chemical stability of SpTrx WT and mutants. 9
4. Conformational flexibility of SpTrx WT and mutants. 10
5. Changes in the secondary and tertiary structures of SpTrx WT and mutants. 10
6. Insulin reduction activity. 11
7. Effect of counterpart mutations on the thermal stability in EcTrx. 11
IV. Discussion 13
References 34
Abstract 41

최근 본 자료

전체보기

구분	그룹	데이터 항목
AI 학습용 데이터	원문	원문 PDF 파일
AI 학습용 데이터	원문 + 메타 (기본/상세)	원문 PDF 파일 및 서지정보 CSV
대량 구매용 데이터	B2B 구독 방식	특정 자료 한정으로 원문 접근 권한 부여
대량 구매용 데이터	URL 전달 방식	바로 PDF 뷰어를 열람할 수 있는 URL 제공

구분	그룹	데이터 항목
AI 학습용 데이터	기본 메타	발행기관명, 간행물명, 권호명, 권(vol), 호(issue), 통권, 발행연도, 발행월, 논문명, 저자명, 시작페이지, 종료페이지, 전체페이지, 상세페이지URL
상세 메타 데이터	발행기관 메타	발행기관 이명, 영문명, 창립연도, 홈페이지URL, 발행기관 소개
	간행물 메타	부제목, 간행물 유형, ISSN, ISBN, 최초발행연도, 폐간연도, 간행빈도, 발행주기, 등재사항, 이용수, 피인용수, 권호수, 논문수, 표지이미지
	논문 메타	작성 언어, 부제목, 대등제목, 목차, 키워드, 초록, 이미지, 참고문헌, 이용수, 피인용수, 논문활용도, DBpia통합주제분류, KDC분류, DDC분류, 한국연구재단분류, UCI, DOI
	저자 메타	소속기관, 소속부서, 직급, 연구분야, 연구키워드, 이용수, 피인용수, 저자 논문활용도

구분	그룹	데이터 항목
※ 결합형/맞춤형 메타 데이터는 신청 내용에 따라 다양하게 제공 가능
이용순위 정보	주제분야별 많이 이용된 논문	“인문학”에서 많이 이용된 논문 TOP100
	이용기관별 많이 이용된 논문	“중고등학교”에서 많이 이용된 논문 TOP100
	세부기관별 많이 이용된 논문	“서울대학교”에서 많이 이용된 논문 TOP100
	키워드별 많이 이용된 논문	“Chat GPT”에서 많이 이용된 논문 TOP100
키워드 정보	많이 이용된 키워드	특정기간/분야/저널 내 많이 이용된 키워드
	많이 발행된 키워드	특정기간/분야/저널 내 많이 발행된 키워드
	많이 검색된 키워드	특정기간/분야/저널 내 많이 검색된 키워드
	연구 트렌드 키워드	특정 키워드 연관 연구동향 분석 데이터 키워드

논문 기본 정보

초록· 키워드

목차

최근 본 자료

댓글(0)