결핵 확진을 위한 MPT64와 TB/NTM RT-PCR의 유용성 및 전통적 배양방법의 효율성 분석 :Analysis of the usefulness of MPT64 and TB/NTM RT-PCR for TB confirmation and the efficiency of traditional culture methods

최호근

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자료유형: 학위논문

저자정보: 최호근 (단국대학교, 단국대학교 대학원)

지도교수: 이영기

발행연도: 2024

저작권: 단국대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

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초록· 키워드

결핵을 유발하는 병원체인 Mycobacterium. tuberculosis는 면역체계를 회피할 수 있으며 잠복 감염으로 숙주 내에서 오랜 기간 동안 살 수 있다. M. tuberculosis의 잠복 상태를 뒷받침하는 분자 메커니즘을 밝히는 것은 결핵 감염에 대한 보다 효과적인 치료법을 개발하는 데 필수적이다. 본 연구에서 경기도 소재 H 대학병원의 미생물학 검사실에 2021년에 의뢰된 검체 6,174건을 대상으로 한 결핵검사의 양성율, 오염률, 내성율을 조사하였다. 항산성균 도말검사에서 양성이 342건(5.5%)였으며, Mycobacterium growth indicator tube (MGIT) 액체배지와 3% Ogawa 고체배지에서 모두 배양되어 검출된 검사는 243건(71.1%)이었고 MGIT배지 또는 3% Ogawa 배지에서만 배양된 경우는 각각 341건(99.7%), 234건(68.4%)로 나타났다. 두가지 배지 모두에서 양성으로 검출된 341건의 검체를 SD BIOLINE TB Ag MPT64 Rapid 검사를 수행하여 결핵균 양성으로 최종 판정된 것은 333건(97.7%)으로 나타났으며 또한 Advansure TB/NTM real-time PCR로 분석한 결과는 279건(81.8%)으로 나타났다.
결핵균으로 동정된 145건에 대하여 항결핵제의 감수성 검사를 수행한 결과 INH02((isoniazid))에 대한 내성률은 23건(15.9%), RIF (rifamycin)은 11건(7.6%), EMB (ethambutol;ETB) 10건(6.9%), RBT (rifabutin;RFB) 10건(6.9%)순으로 나타났다. 한편, 오염율 조사는 액체배지에서 255건(4.4%), 고체배지는 254건(4.4%)으로 나타났다.
결핵의 확진을 위해 다양한 검사법을 이용하고 있는데 전통적 배양 검사와 RT-PCR의 상관관계를 알아본 결과, 특히 액체배양 검사는 시간이 오래 걸리는 단점이 존재하지만 시간이 상대적으로 빠른 RT-PCR 보다 정확한 결과를 확인 할 수 있었다. 빠른 결핵의 동정으로 감수성 검사를 통해 적절한 항생제 처방을 할 수 있을 것이다.
결론적으로 결핵의 동정률을 높이기 위해 전통적 배양검사와 MPT64, RT-PCR 검사를 병행하는 것이 확진에 더 효율적일 것으로 생각된다. 이를 통해 축적된 정보를 활용해 약물 내성 결핵균의 내성획득 위험을 낮추며, 세균 제거를 통해 감염 기간을 단축하고 염증 및 폐 조직 손상을 감소시킬 수 있을 것이다. 이번 연구를 통해 현재보다 더 나은 임상 치료의 기초자료가 될 것으로 판단된다.

Mycobacterium tuberculosis-causing pathogen, Mycobacterium tuberculosis, can evade the immune system and can live in the host for a long period of time as a latent infection. The elucidation of the molecular mechanisms that support the latent state of M. tuberculosis is essential for the development of more effective treatments for tuberculosis infection. In this study, the positive rate, contamination rate, and resistance rate of the tuberculosis test of 6,174 samples referred to the microbiology laboratory of H University Hospital in Gyeonggi-do in 2021 were investigated. There were 342 cases (5.5%) of positive in the acid-fast bacillus smear test, and 243 cases (71.1%) were detected by culturing in both Mycobacterium growth indicator tube (MGIT) broth and 3% Ogawa solid broth, and 341 cases (99.7%) and 234 cases (68.4%) were cultured in MGIT broth or 3% Ogawa broth, respectively. The SD BIOLINE TB Ag MPT64 rapid test of 341 samples detected as positive in both media was performed, and 333 (97.7%) were finally determined as positive for tuberculosis, and 279 (81.8%) were analyzed by Advansure TB/NTM real-time PCR.
As a result of performing the sensitivity test of anti-tuberculosis drugs on 145 cases identified as tuberculosis bacteria, the resistance rate to INH02(isoniazid) was 23 cases (15.9%), RIF (ripamycin) was 11 cases (7.6%), EMB (ethambutol;ETB) 10 cases (6.9%), and RBT (ripabutin;RFB) 10 cases (6.9%). Meanwhile, the contamination rate survey was 255 cases (4.4%) in the liquid medium and 254 cases (4.4%) in the solid medium.
Various test methods are used to confirm the confirmation of tuberculosis. As a result of examining the correlation between the traditional culture test and RT-PCR, in particular, the liquid culture test has the disadvantage of taking a long time, but in particular, it was possible to confirm the more accurate result than RT-PCR, which is relatively fast. With the rapid identification of tuberculosis, an appropriate antibiotic prescription can be made through a susceptibility test.
In conclusion, in order to increase the identification rate of tuberculosis, it is thought that it would be more efficient to confirm the infection by combining the traditional culture test with MPT64, and RT-PCR tests. Through this, the accumulated information will be used to reduce the risk of acquiring resistance to drug-resistant tuberculosis bacteria, and through bacterial removal, the infection period can be shortened and inflammation and lung tissue damage can be reduced. This study is believed to provide the basic data for better clinical treatment than the present.

국문초록 ·ⅰ
감사의 글 iii
목 차 · v
List of Tables · vii
List of Figures viii
Ⅰ. 서론 · 1
Ⅱ. 재료 및 방법 6
1. 연구 대상 · 6
2. 연구 방법 · 7
1) 검체 전처리 7
2) 항산균 도말 검사 · 8
3) 항산균 배양 검사 10
4) Rapid immunochromatographic 검사 12
5) Advansure TB/NTM real-time PCR 14
6) 항균제 감수성 검사 · 16
7) 오염률 조사 18
3. 분석 19
Ⅲ. 연구결과 20
1. 항산균 도말 검사 20
2. 항산균 배양 검사 21
3. Rapid immunochromatographic 검사 · 22
4. Advansure TB/NTM real-time PCR 23
5. 항균제 감수성 검사 24
6. 오염률 조사 · 28
Ⅳ. 고찰 29
참고문헌 36
영문초록 46

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