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초록·키워드
간세포암(Hepatocellular carcinoma, HCC)은 전 세계적으로 높은 발생률과 사망률을 보이는 대표적인 간암으로, 간 섬유화와 간경변으로 인해 발생한다. 기존 치료법의 한계로 인해 효과적인 새로운 치료 전략이 요구된다. 최근 여러 경로를 표적으로 하는 병용 요법이 단독 치료의 한계를 극복하고 치료 효과를 극대화할 수 있는 전략으로 주목받고 있다. 대칠기탕(DCGT)을 포함한 전통 한약은 간 관련 질환 치료에 사용되어 왔으며, auranofin (AF)은 산화 스트레스 조절을 통한 항암 효과로 알려져 있습니다. 따라서 본 연구에서는 Hep3B 간암세포에서 AF와 DCGT의 시너지 효과를 규명하고자 하였다. 다양한 농도의 AF와 DCGT의 병용 처리는 세포 생존율을 유의적으로 감소시키고, TrxR 활성을 억제하여 항암 활성에 대해 시너지 효과를 나타내었다. AF 및 DCGT에 의한 항암 활성과 apoptosis와의 연관성을 조사하기 위해 Annexin V/PI 염색 및 단백질 발현량을 조사한 결과, apoptosis 증가와 함께 pro-caspase-3, -8 및 -9의 단백질 수준 감소, PARP 절단 증가, XIAP 및 cIAP-1의 발현 감소가 관찰되었다. 또한, JC-1 염색을 통해 미토콘드리아 막전위(MMP) 손실이 증가하였으며, 이를 통해 AF와 DCGT에 의해 미토콘드리아의 기능 손상이 유발된 것을 확인하였다. 그리고 AF와 DCGT 처리에 의해 세포 내 ROS 생성이 증가하였고, ROS 소거제의 전처리에 의해 AF와 DCGT에 의해 유도된 apoptosis와 MMP 손실이 억제되어 ROS가 AF 및 DCGT의 항암활성에 중요한 역할을 한다는 것을 확인하였다. 또한, 3D-spheroid 모델에서도 AF와 DCGT를 병용 처리했을 때 spheroid 크기 감소, 표면 구조 변화 및 ROS 수치 증가를 관찰하였다. 이는 3D-spheroid 모델에서 병용 치료가 항암 효과를 나타냄을 시사했다. 본 연구는 ROS 생성을 통한 미토콘드리아 매개 apoptosis 유도 기전을 규명함으로써 간암 치료에서 AF와 DCGT의 병용 처리가 유망한 치료 전략으로서의 가능성을 제시한다.
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