이 실험에서는 Ehrlich 암세포를 샅부위에 이식한 후 일반적으로 많이 사용되는 항암제인 5-fluorouracil, mitomycin C와 새로 개발된 항암제인 acriflavine-guanosine 복합제(AG60)를 투여하였을 때, 곧창자조직의 형태학적 변화를 연구하고자 ³H-thymidine 을 투여한 후 자기방사법적 연구를 시행하여 곧창자조직의 형태학적 변화 뿐만 아니라 DNA합성지수를 비교 연구하고자 하였다.
실험동물로는 체중 25 gm내외의 성숙한 생쥐(ICR계통)를 사용하였다. 정상대조군 이외의 실험군 동물들은 샅부위의 피부밑조직에 각각 1×10^7개의 Ehrlich암세포를 이식한 후 다음날부터 실험군별로 5-fluorouracil 30mg/kg, mitomycin C 400 μg/kg, AG60 5 mg/kg를 격일 간격으로 7회 투여하였다. 자기방사법적 관찰을 위하여 ³Hthymidin 0.7 μCi/gm를 꼬리에 한 번 정맥주사하고, 70분 후 도살하여 곧창자조직을 떼어내어 10% formalin에 고정한 후 표본을 제작하였다.
일반조직관찰에서 암세포이식대조군과 AG60 투여군의 경우 조직학적 구조는 정상대조군에 비하여 고유판에서 림프구와 호산성백혈구가 비교적 많이 관찰된 것 외에는 별다른 차이를 관찰할 수 없었다. 그러나 5-fluorouracil투여군은 창자움의 샘상피세포들이 정상대조군에 비하여 다소 위축되어 보였으며, mitomycin C 투여군은 창자움이 더욱 위축되어 정상대조군에 비하여 폭이 좁게 보였을 뿐만 아니라 호산성백혈구도 더욱 많이 관찰되었고, 핵이 농염되고 용해되는 과정의 세포들이 자주 관찰되었다. 자기방사법적 연구에서 정상대조군, 암세포이식대조군, 5-fluorouracil 투여군, mitomycin C 투여군, AG60 투여군은 점막길이 3.5 mm 당 출현하는 표지세포수가 각각 246.3±42.30, 253.8±20.54, 172.7±19.02, 108.7±17.67, 53.8±11.70 였다. 특히 mitomycin C 투여군과 AG60 투여군은 정상대조군에 비하여 은입자의 수가 적은 세포가 많았으나, 암세포이식대조군은 은입자가 밀집되어 있는 세포가 정상대조군에 비하여 더 많이 관찰되었다.
이상의 결과를 종합하여 보면 생쥐 곧창자점막조직에는 5-fluorouracil에 비하여 mitomycin C와 AG60이 점막상피세포의 DNA합성에 더 억제적으로 작용하였으며, 특히 AG60은 5-fluorouracil에 비하여 점막상피세포의 DNA합성을 억제하는 효과가 더 높을 뿐만 아니라 곧창자점막조직에 형태적인 손상을 거의 주지 않는 항암제라고 생각한다.
This experiment was performed to evaluate the morphological responses of the intestinal gland of the mouse, rectum inoculated with Ehrlich carcinoma cells, following administration of 5-fluorouracil, mitomycin C or AG60.
Healthy adult ICR mice weighing 25 gm each were divided into normal and experimental groups (tumor control group, 5-fluorouracil, mitomycin C treated group, and AG60 treated group). In the experimental groups, each mouse was inoculated with 1×10^7 Ehrlich carcinoma cells subcutaneously in the inguinal area. From next day, 0.2 mL of saline, 5-fluorouracil (30 mg/kg), mitomycin C (400 μg/kg) or AG60 (5 mg/kg) were injected subcutaneously to the animals every other day, respectively. The day following the 7th injection of anticancer drugs, each mouse was injected with a single dose of 0.7 μCi/gm of methyl-³H-thymidine through tail vein. Seventy minutes after the thymidine injection, animals were sacrificed. The number of the labeled epithelial cells of the rectal crypts (mean number of labeled epithelial cells per 3.5 mm length of mucosa) were observed and calculated.
On histological study, in the rectum of mitomycin C treated groups, narrowed intestinal gland, a number of the nectotic changed epithelial nuclei and loosely arranged lamina propria were observed. But in the AG60 treated group, morphological changes of the rectum were not observed. On autoradiographic study, number of the labeled cells of normal control, tumor control, 5-fluorouracil (30 mg/kg) treated, mitomycin C (400 μg/kg) treated and AG60 (5 mg/kg) treated groups were 246.3±42.30, 253.8±20.54, 172.7±19.02, 108.7±17.67 and 53.8±11.70, respectively. In the AG60 and mitomycin C treated group, poorly-labeled cells containing only a few silver grains of ³H-thymidine were observed more frequently than in those of the normal control group.
From the above results, AG60 (5 mg/kg) and mitomycin C (400 μg/kg) are more suppressed the DNA synthesis of the cells of the rectal crypts as compare with 5-fluorouracil (30 mg/kg). And AG60 does not result any histological defect on the rectal mucosa. These results suggest that AG60 is expected as one of most effective anticancer drugs.