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단일클론항체 AP64 IgM은 인간의 급성 비임파성 골수암 (ANLL) 세포주 HL60에 결합하며 쥐의 ANLL 세포에도 교차 결합(cross-react)한다. 또한 complement에 의해 매개되어지면 골수암 억제효과를 나타낸다. 본 연구에서는 RT-PCR에 의해 AP64 IgM을 분비하는 하이브리도마의 V<SUB>H</SUB> 및 V<SUB>L</SUB> cDNA로 부터 유래된 재조합 single-chain variable domain fragment (ScFv)를 제조하였다. V<SUB>H</SUB> 및 V<SUB>L</SUB>은 15개 아미노산으로 구성된 linker (G₄S)₃으로 연결되었다. 재조합 ScFv는 Escherichia coli BMH 71-18에서 single polypeptide chain으로 발현되었다. Periplasmic extract를 Ni + -NTA-agarose affinity column에 가하여 발현된 재조합 ScFv를 정제하였으며 westernblot으로 정제된 단백질을 탐지하였다. 정제된 재조합 ScFv는 AP64 IgM 모항체가 탐지하는 항원과 같은 HL60 세포의 표면항원 (약 30 kDa)을 인지하였다. 그러나 HL60의 표면항원에 대한 ScFv의 결합력은 AP64 IgM 모항체보다 낮아서 추후 이에 대한 개선이 필요하다. 종합하여 볼 때 HL60 세포주에 특이적인 재조합 ScFv는 진단 또는 치료목적으로 유용한 생물학적 제재가 될 수 있을 것이다.
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