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논문 기본 정보

자료유형
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저자정보
저널정보
한국육종학회 한국육종학회지 한국육종학회지 제41권 제3호
발행연도
2009.1
수록면
252 - 260 (9page)

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Rice is the most important cereal crop not only in supplying the basic staple food for more than half of the world's population but also as a model plant for functional genomic studies of monocotyledons. Although rice transformation method using A. tumefaciens has already been widely used to generate transgenic plants, the transformation rate is still low in most Korean elite cultivars. We made several modifications of the standard protocol especially in the co-cultivation step to improve the efficiency of the rice transformation. The co-culture medium was modified by the addition of three antioxidant compounds (10.5 mg/L L-cysteine, 1 mM sodium thiosulfate, 1 mM dithiothreitol) and of Agrobacterium growth-inhibiting agent (5 mg/L silver nitrate). Co-cultivation temperature (23.5℃ for 1 day, 26.5℃ for 6 days) and duration (7 days) were also changed. The plasmid of pMJC-GB-GUS carrying the GUS reporter gene and the bar gene as the selectable marker was used to evaluate the efficiency of the transformation. After co-cultivation, a high level of GUS gene expression was observed in calli treated with the modified method. It is likely that those newly added compounds helped to minimize the damage due to oxidative bursts during plant cell-Agrobacterium interaction and to prevent necrosis of rice cells. And the transformation rate under the modified method was also remarkably increased approximately 8-fold in Heungnambyeo and 2-fold in Ilmibyeo as compared to the corresponding standard method. Furthermore, we could produce the transgenic plants stably from Ilpumbyeo which is a high-quality rice but its transformation rate is extremely low. Transformation and the copy number of transgenes were confirmed by PCR, bar strip and Southern blot analysis. The improved method would attribute reducing the effort and the time required to produce a large number of transgenic rice plants.
#Rice transformation #Co-cultivation medium #Culture conditions #Transformation rate

목차

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참고문헌 (24)

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Chan MT / 1993 / Agrobacterium tumefaciens production of transgenic rice plants expressing a chimeric alpha-amylase promotor/beta- glucuronidase gene / Plant Mol Biol. 22 : 4 google schola Charles LA / 2001 / Agrobacterium-mediated plant transformation method google schola Cheng M / 2004 / Invited reviews: Factors influencing agrobacterium-mediated transformation of monocotyledonous species / In Vitro Cell. Dev. Biol.-plant 40 : 31 ~ 45 google schola Christou P / 1991 / Production of transgenic rice (Oryza sativa L.) plants from agrono­mically important Indica and Japonica varieties via electric discharge particle accele google schola Datta SK / 1990 / Genetically engineered fertile Indica rice recovered from protoplasts / Bio/Technology 8 : 736 ~ 740 google schola

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