β-galactosidase를 공유결합으로 키토산 담체에 고정화하여 고정화 효소의 특성을 조사하였다. 또한 충진층 반응기에서 연속 조업을 실시하여 공정 최적화를 실시하였다. 키토산 담체에 대한 효소 고정화 효율은 최대 75%을 나타내었다. 고정화 효소에 대한 최적의 pH는 7.0이었고 최적의 온도는 50℃였다. pH와 온도의 실험 범위에서 고정화 효소가 자유 효소에 비해 넓은 분포를 보여 pH와 온도에 덜 민감하게 작용하였다. 충진층 반응기에서 고정화 효소의 운전에 대한 수학적 모델을 세우고 수치적으로 해를 구하였다. 투입되는 유당의 농도와 유량에 대해서 충진층 반응기의 출구에서 유당의 전환율을 측정하였다. 실험 결과를 경쟁적 저해 효소 반응식과 물질전달 저항을 고려한 수학적 모델의 결과와 비교하였다. 모델의 결과는 실험 결과를 5% 이내의 오차로 잘 예측하였다. 그리고 충진층 반응기의 길이에 따른 유당 전환율과 연속운전 시간에 따른 효소의 비활성화를 고려한 전환율을 모델로부터 예측하였다.
β-Galactosidase was immobilized on chitosan bead by covalent bonding using glutaraldehyde. The characteristics of the immobilized enzyme were investigated. Maximum immobilization yield of 75% was obtained on chitosan bead. Optimum pH and temperature for the immobilized enzyme was 7.0 and 50℃, respectively. The immobilized enzyme showed a broader range of pH and temperature compared to a free one. A mathematical model for the operation of the immobilized enzyme in a packed-bed reactor was established and solved numerically. Under different inlet lactose concentrations and feed flow rate conditions, lactose conversion was measured in a packed-bed reactor. The experimental results of continuous operation in a packed-bed reactor were compared to theoretic results using Michaelis-Menten kinetics with competitive product inhibition and external mass transfer resistance. The model predicted the experimental data with errors less than 5%. Process optimization of continuous operation in a packed-bed reactor was also conducted. In a recirculation packed-bed operation, conversion of lactose was 97% in 3 hours. In a continuous packed-bed operation, the effect of flow rate and initial lactose concentration was investigated. Increasing flow rates and initial lactose concentration decreased the conversion of substrate.