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자료유형
학술저널
저자정보
Phu Van Nguyen (경기대학교) Boram Lee (경기대학교) Mi-Sun Yoo (경기대학교) Byoung-Su Yoon (경기대학교)
저널정보
한국양봉학회 Journal of Apiculture 한국양봉학회지 제27권 제1호
발행연도
2012.4
수록면
51 - 58 (8page)

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A novel loop-mediated isothermal amplification (LAMP) method was developed for the specific detection of Melissococcus plutonius, which is the causative agent of European foulbrood (EFB), a bacterial disease affecting honeybee larvae. The present LAMP method was performed at 62°C for 30 min with no need for thermal cycling, using primers designed on the basis of the DNA gyrase subunit B gene (GyrB). The specificity of EFB-LAMP was confirmed by successful amplification of the bee genome infected with M. plutonius and through EcoRI restriction enzyme analysis of LAMP products. This method detected as little as 2 fg of DNA plasmid. Visual inspection of LAMP products was carried out using DNA intercalating dyes, a metal indicator, and pH indicators. Using Gene Finder, this method showed the greatest potential for clinical diagnoses of M. plutonius due to its exhibition of distinct and different colors in daylight between positive and negative reactions. Therefore, this rapid, sensitive, specific, and low-cost detection method can be used to facilitate development of apiaries.
#LAMP detection #DNA gyrase subunit B #Melisococus plutonius #EFB

목차

Abstract
INTRODUCTION
MATERIALS AND METHODS
RESULTS
DISCUSSION AND CONCLUSION
ACKNOWLEDGEMENTS
LITERATURE CITED

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