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Dang Viet Cao (제주대학교) Reniel S. Pamplona (제주대학교) 김지원 (우정과학생명연구소) 오영경 (제주대학교) 조석근 (연세대학교) 안종철 (우정과학생명연구소) 양성욱 (연세대학교) 류기중 (제주대학교) 부경환 (제주대학교)
저널정보
한국식물생명공학회 Plant Biotechnology Reports Plant Biotechnology Reports 제11권 제6호
발행연도
2017.12
수록면
397 - 405 (9page)

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The Agrobacterium-mediated transient assay is a relatively rapid technique and a promising approach for assessing the expression of a gene of interest. Despite the successful application of this transient expression system in several plant species, it is not well understood in spinach. In this study, we analyzed various factors, including infiltration method, Agrobacterium strain and density, and coinfiltration of an RNA silencing suppressor (p19), that affect transient expression following agroinfiltration in spinach. To evaluate the effects of these factors on the transient expression system, we used the b-glucuronidase (GUS) reporter gene construct pB7WG2D as a positive control. The vacuum-based infiltration method was much more effective at GUS gene expression than was the syringe- based infiltration method. Among the three Agrobacterium strains examined (EHA105, LBA4404, and GV2260), infiltration with the GV2260 strain suspension at a final optical cell density (OD600) of 1.0 resulted in the highest gene expression. Furthermore, co-expression of suppressor p19 also increased the efficiency and duration of gene expression and protein accumulation. The results indicate that the use of optimized conditions for transient gene expression could be a simple, rapid, and effective tool for functional genomics in spinach.

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