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전 연구에서 해양세균 Streptomyces sp. M3의 새로운 alginate 분해효소를 signal peptide가 제거된 상태로 클로닝하고 E. coli BL21 (DE3) 균에 형질전환시켰다. 본 연구에서는 배양할 때 IPTG를 첨가하여 M3 alginate 분해효소 단백질을 과발현시키고 Ni-Sepharose 친화력 chromatography로 정제하여 생화학적 성질을 조사하였다. 기질특이성을 시험하기 위한 235 ㎚에서의 흡광도와 TLC 분석 결과로부터 M3 alginate 분해효소가 polyG block에 기질특이성을 나타냄을 알 수 있었다. M3 분해효소를 기질과 10분 동안 반응시켰을 때, 최적 pH 및 최적온도는 pH 9 및 60oC 이었다. 1 mM Ca<SUP>++</SUP> 및 Mn<SUP>++</SUP>은 alginate 분해활성을 2배 증가시킨 반면 Hg<SUP>++</SUP> 및 Zn<SUP>++</SUP>는 분해활성을 완전히 저해하였다. Mg<SUP>++</SUP>, Co<SUP>++</SUP>, Na?, K?, 및 Ba<SUP>++</SUP>은 M3 alginate 분해효소의 활성에 거의 영향을 미치지 않았다.
목차
Introduction
Materials and Methods
Results and Discussions
Acknowledgement
References
초록
참고문헌 (25)
참고문헌 신청
1. [학술지(정기간행물)] - Akiyama, H. / 1992 / Effect of depolymerized alginates on the growth of bifidobacteria / Biosci. Biotechnol. Biochem. 56 : 355 ~ 356
2. [학술지(정기간행물)] - Alipour, M. / 2009 / Importance of DNase and alginate lyase for enhancing free and liposome encapsulated aminoglycoside activity against Pseudomonas aeruginosa / J. Antimicrob. Chemother 64 : 317 ~ 325
3. [학술지(정기간행물)] - Andrade, L. R. / 2004 / Ultrastructure of acidic polysaccharides from the cell walls of brown algae / J. Struct. Biol 145 : 216 ~ 225
4. [학술지(정기간행물)] - Butler, D. M. / 1989 / Isolation conditions for high yields of protoplasts from Laminaria saccharina and Laminaria digitata (Phaeophyceae) / J. Exp. Bot. 40 : 1237 ~ 1246
5. [학술지(정기간행물)] - Boyen, C. / 1990 / Preparation of guluronate lyase from Pseudomonas alginovora for protoplast isolation in Laminaria / Enzyme Microb. Technol 12 : 885 ~ 890
2. [학술지(정기간행물)] - Alipour, M. / 2009 / Importance of DNase and alginate lyase for enhancing free and liposome encapsulated aminoglycoside activity against Pseudomonas aeruginosa / J. Antimicrob. Chemother 64 : 317 ~ 325
3. [학술지(정기간행물)] - Andrade, L. R. / 2004 / Ultrastructure of acidic polysaccharides from the cell walls of brown algae / J. Struct. Biol 145 : 216 ~ 225
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5. [학술지(정기간행물)] - Boyen, C. / 1990 / Preparation of guluronate lyase from Pseudomonas alginovora for protoplast isolation in Laminaria / Enzyme Microb. Technol 12 : 885 ~ 890
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