님트리(Azadirachta indica)잎 에탄올추출물의 약리활성 및 안티폴루션 효능 검증

현진아; 이지혜; 강은빈; 김현정; 김동인; 박가은; 곽기성; 안봉전

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자료유형: 학술저널

저자정보: 현진아 (대구한의대학교) 이지혜 (대구한의대학교) 강은빈 (허니스트) 김현정 (대구한의대학교) 김동인 (대구한의대학교) 박가은 (대구한의대학교) 곽기성 (허니스트) 안봉전 (대구한의대학교)

저널정보: 한국식품저장유통학회 Food Science and Preservation 한국식품저장유통학회지 제27권 제3호

발행연도: 2020.6

수록면: 393 - 406 (14page)

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본 연구에서는 님트리 70% 에탄올 추출물을 이용하여 항산화, 항염, 미백, 주름 및 미세먼지와 중금속으로부터 세포보호 효과를 연구하여 기능성 화장품 소재로서 가능성을 확인하였다. 폴리페놀 함량은 51.37 mg/g을 함유하고 있으며, DPPH 라디칼 소거능과 ABTS 라디칼 소거능은 최종 농도인 1,000 μg/mL에서 각 34.09%, 72.18%의 활성을 나타내었다. SOD 실험에서는 최종 농도인 1,000 μg/mL에서 24.13%의 효과를 보였다. 미백 효과를 확인하기 위해, 최종 농도 1,000 μg/mL에서 티로시나아제 억제효과는 47.21%였다. 또한, 님트리잎 추출물을 이용해 세포 독성을 확인하기 위해 대식세포(RAW 264.7)에 MTT assay 실험을 한 결과, 100 μg/mL의 이하 농도까지 세포 생존율에 영향을 미치지 않음을 확인하였다. LPS로 자극해 염증반응을 유도시킨 대식 세포를 이용한 세포의 소염(NO) 분석에서는 최종농도인 1,000 μg/mL에서 68.86% 및 66.45%의 소염 활성을 나타냈다. 또한, iNOS 단백질은 100 μg/mL 농도에서 97.49%의 억제율이 나타났다. 각질세포(HaCaT)를 사용한 세포 독성 분석(MTT assy)에서, 세포 생존율은 10 μg/mL에서 처리되지 않은 대조군의 세포 생존율과 유사하였다. 또한, western blotting으로 MMP-1의 억제율을 확인하였다. 추가적으로 사람 피부 세포인 HaCaT cell과 CCD-986sk cell를 미세먼지와 중금속 성분인 benzo[e]pyrene(BP)으로 자극시킨 뒤 님트리 추출물을 처리해 자극된 세포들이 추출물에 의한 개선효과와 세포생존율을 측정해 anti-pollution 효능을 확인했다. Benzo[e]pyrene으로 자극한 세포는 25 μg/mL의 농도에서 HaCaT cell과 CCD cell 각각 92%, 81% 이상의 개선 효과를 보였고, 미세먼지로 자극한 세포는 25 μg/mL의 농도에서 HaCaT cell과 CCD cell 각 85%, 76% 이상의 개선 효과를 보였다. 따라서 님트리 70% 에탄올 추출물은 미세먼지 차단 화장품 소재로서의 화장품 및 기능성 활용가치가 있을 것으로 사료된다.

In this study, we investigated the anti-oxidant, anti-inflammatory, whitening, anti-wrinkle, and anti-pollution effects of Neem tree (i.e., Azadirachta indica leaf) 70% ethanol extract. More specifically, the polyphenol content was 51.37 mg/g, and the DPPH and ABTS radical scavenging activities were 34.09 and 72.18%, respectively, at a final concentration of 1,000 μg/mL. SOD experiments showed an effect of 24.13% at a final concentration of 1,000 μg/mL. In addition, to investigate the whitening effect, the tyrosinase inhibition effect was measured, giving a value of 47.21% at a final concentration of 1,000 μg/mL. Furthermore, MTT assay experiments were carried out on macrophages (RAW 264.7) to determine the cytotoxicity using the neem tree leaf extract, it was confirmed that the cell viability was unaffected up to a concentration of 100 μg/mL. Moreover, anti-inflammatory (NO) analysis of the cells using macrophages stimulated with LPS induced an inflammatory response of 68.86%, in addition to an anti-inflammatory activity of 66.45% at a final concentration of 100 μg/mL. The iNOS protein showed an inhibition rate of 97.49% at a concentration of 100 μg/mL, and in the cytotoxicity assay (MTT assay) using keratinocytes (HaCaT), the cell viability was similar to that of the untreated control at 10 μg/mL. Western blotting analysis confirmed the inhibition rate of MMP-1. Additionally, HaCaT and CCD-986sk human skin cells were stimulated with benzo[e]pyrene, which contains fine dust and heavy metals, and then treated with neem tree extract to measure the effect of the extract on the cell viability. Indeed, the anti-pollution efficacy of the extract was confirmed. Overall, the benzo[e]pyrene-stimulated cells presented improvements of >92 and 81% for the HaCaT and CCD cells at a concentration of 25 μg/mL, while improvements were observed at a concentration of 100 μg/mL HaCaT for fine dust-stimulated cells. Moreover, HaCaT cell and CCD cells showed improvements of more than 85 and 76%, respectively. The obtained results therefore indicate that Neem tree 70% ethanol extract is expected to have value for application in cosmetics due to its pharmacological activity and its fine dust-blocking properties.

#Azadirachta indica #anti-pollution #fine dust #benzo[e]pyrene #validation of pharmacological activity

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